| 中國水產頻道原創報道， 產品要想用好，一是要符合產品的基本特性，不能違背基本規律；二是在實際應用場景中，要和現實相結合，尋找最佳的使用方法 編輯/水產前沿唐東東 近兩年，蛭弧菌凍干粉市突然大熱起來。細思下來，一方面水產養殖的密度在增加，各種未知疾病或者混合型疾病日益增多；另一方面，從公司至經銷商再到養殖戶，面對日益增加又難以查明的疾病，多數是束手無策，很多化學型消毒劑，效果來的快去的也快，有時候刺激也大一些，而且也不能總是經常使用，因此蛭弧菌又重新被大家推廣起來。
南京新的生物制品有限公司趙海永 為了讓大家更了解蛭弧菌，我們對話了南京新的生物制品有限公司（簡稱“新的生物”）負責水產事業版塊的趙經理。新的生物在十余年前就開始關注蛭弧菌，經過多年的持續摸索，已具備蛭弧菌制種、發酵及凍干的全過程生產和服務能力，能為客戶提供蛭弧菌“原裝凍干”產品。
蛭弧菌原裝凍干 蛭弧菌市場復燃的原因 水產前沿：蛭弧菌產品在行業內曾經火過，但又銷聲匿跡，到現在又重新火起來了，你認為是什么原因呢？這對于蛭弧菌系列產品有什么影響呢？ 趙經理：水產蛭弧菌在上世紀90年代就應用于水產上了，2000年初的時候福潤德曾靠“三聯噬菌皇”風行水產業界，但后來蛭弧菌又銷聲匿跡了很久，這幾年隨著業內幾家公司的推廣，又重新火了起來。 這里面除了公司的一些推廣之外，還有一些原因是需要我們了解的。實際上，我們認為，2000年初之所以能推廣起來，是因為蛭弧菌這個產品的概念新，也能見到效果，但之所以又沉寂下去，是因為效果慢，比不過消毒劑，而且沒有系統的研究實際使用方法，做不到最大效果化，從而市場整體性認可性不好，尤其是2000年初還是化學消毒劑大行其道的時候，這對蛭弧菌的沖擊就更大了一些。 之所以近兩年又重新熱了起來，也是和大環境和產品本身有關系，一則消毒劑這兩年大家都謹慎使用，而疾病又呈現多樣化，我們希望有安全可控的產品出現。另外，作為生物消毒劑的蛭弧菌確實有其本身的特點，尤其是安全，再加上替抗的一些概念的提出，同時凍干這個工藝的成本也大幅度降低，從而成品的活性、效果都有了較好的保留，這為市場的推廣做了很好的鋪墊，從而有了蛭弧菌凍干粉的又一次大熱。 從產品的系列上來講，蛭弧菌產品有稀釋液、母液、凍干粉、原裝凍干等四大系列。總體來說，蛭弧菌產品在功效上是明確的，水產動保行業也是需要的，但我們要從生產的基本技術上提升產品質量，首先做好質量的保障，再從實際應用層面出發，探索最適合蛭弧菌產品的一些使用方法，爭取讓一個好的產品健康地生存在動保行業中。 水產前沿：蛭弧菌和普通微生物產品到底有什么不同？ 趙經理：首先，效果表達的途徑不一樣。普通微生物在水產養殖上發揮效果大多數是通過“占位理論”實現的（在體外或體內），或者通過分泌胞外物質抑制其他微生物繁殖而發揮效果。蛭弧菌不是，蛭弧菌具有“不服則干”的特性，其通過寄生和裂解的生理手段，能在體外直接殺滅一些有害菌，還能在體內發揮有益微生物的效果，這使得蛭弧菌有著益生素和“活性抗生素”的雙重特性。 其次，在發酵上面，普通微生物發酵是在人工合成的培養基里接種菌種。而蛭弧菌發酵則要先生產大腸桿菌，提供宿主菌，再接種蛭弧菌種。 另外，普通的微生物一般是通過無性二分裂方式繁殖，而蛭弧菌是通過復制的方式繁殖。前者繁殖速度很快，后者的速度較慢。 重點推廣“原裝凍干”產品 水產前沿：南京新的生物制品有限公司是如何進入蛭弧菌生產這個版塊的？ 趙經理：南京新的生物制品有限公司成立于2007年，實際上在成立之前，公司創始人徐麗女士就已經接觸過蛭弧菌，成立企業之后，新的生物在蛭弧菌的生產、研發上也沒有停止過，但隨著蛭弧菌大行情的波動，公司只能在代工上重點發力，一直為兄弟單位提供蛭弧菌母液及稀釋液等產品。近兩年隨著凍干成本的不斷下降，產品的保存期得到了質的突破，活性也基本是完美保留，于是公司進一步的增加了投入，上了蛭弧菌原裝凍干設備，讓產品升級換代。 新的目前重點在于推廣蛭弧菌“原裝凍干”產品，原裝凍干可以保證蛭弧菌產品的活性最大化，同時因為在凍干機內就完成了封瓶，所以凍干瓶內仍保持真空狀態，這對蛭弧菌產品的保護也是最佳的，能大大延長產品的保質期。 水產前沿：2018年底的時候，為什么南京新的生物在凍干設備上投入近百萬，相比公司1500萬元的年銷售額，這是一筆非常大的開支了，行業內做蛭弧菌的企業好像還沒有人這樣做，請問這樣的投資是一種理性的行為么？ 趙經理：南京新的生物制品有限公司之所以在凍干設備上投入如此資金，主要是考慮以下幾點： 1.南京新的生物生產蛭弧菌已有10多年的時間，也一直非常關注蛭弧菌產品的演變。最早的是液體產品，我們就一直用發酵罐進行生產，但是液體產品的保藏始終面臨一些天花板問題，這對實際使用效果有非常大的影響。南京新的生物也一直在思考如何突破技術和成本的雙重難關，而凍干則是最好的一種保存方式。 2.我們一直在關注凍干，也組織了專家對凍干產品的原理及與蛭弧菌的結合做了論證。早期主要是硬件的成本投資太高，同時產品銷量預估受第一階段蛭弧菌下降的影響，未敢一次性投入，于是采取代工的形式生產蛭弧菌凍干粉。此期間，我們做了大量的試驗，確保了蛭弧菌凍干粉產品的穩定性，同時也確定了蛭弧菌原裝凍干在產品保質期上的突破具有無與倫比的優勢。 3.近兩年養殖密度整體是呈現上升趨勢，而且生態防控這個概念也不斷加強。水體內的總菌數、異養菌數、弧菌數的控制變成一個難題，只依靠化學類消毒劑無法完成這個工作，因為化學消毒劑效果來得很快，但去的也很快。而蛭弧菌恰恰可以彌補這個缺陷，因為蛭弧菌的缺點是效果來得慢一些，但是中后期的防控時間特別長，其發揮的效果基本可以達到15天左右；同時再加上成品質量的穩定性在不斷進步，所以使用效果上面得到了較好的體現，產品的總量也在增加。 4.我們本身有很多的代工客戶。很多都是在我們公司代工生產蛭弧菌液體，這兩年隨著市場對蛭弧菌凍干粉的呼聲越發高漲，他們也在催促我們上一臺凍干機，可以讓他們有更多的選擇。 綜合以上幾個方面，公司在2018年下定決心，于10月份采購了一臺價值近百萬的大型凍干機（單次凍干1萬瓶），以完成從蛭弧菌母液發酵至蛭弧菌凍干的全程掌控，從而能為客戶提供穩定的蛭弧菌原裝凍干產品。
圖1，蛭弧菌發酵罐
圖2，凍干機側面一
圖3，凍干機側面二
圖4，凍干機正面 蛭弧菌凍干的優勢與特征 水產前沿：請介紹下蛭弧菌凍干的全過程。 趙經理：主要分為以下幾個過程： 1.蛭弧菌發酵。首先，我們要完成蛭弧菌母液的發酵，獲得穩定的蛭弧菌液體。 2.添加保護劑。將脫脂奶粉等保護劑與蛭弧菌母液進行混合，做好凍干前的保護工作。 3.擺盤裝瓶。所有的西林瓶在大盤中擺好，同時將加好保護劑的母液裝入西林瓶中，并將瓶蓋不完全蓋上，保持瓶內、外的通氣狀態。 4.凍干壓蓋。直接進入凍干機中，通過凍結、升華、再干燥三個過程，通過升華過程將母液中的冰幾乎全部散發掉后，再由機器統一壓蓋，保證瓶內處于“真空”狀態。
第一步：灌裝
第二步：裝蓋
第三步：擺盤
第四步：凍干
第五步：原裝凍干成品 水產前沿：您認為蛭弧菌“原裝凍干”有哪些產品優勢？產品的穩定性又如何保障？ 趙經理：目前蛭弧菌類產品基本上有兩類，一是液體，一是凍干粉。 蛭弧菌液體的產品始終面臨保存的問題，實際上也有很多的論文對此做了研究，有的文章指出，大多數的液體蛭弧菌產品在4℃的環境下，可以保存8個月以上，少數6個月以上。但在25℃的環境下，蛭弧菌液體產品的保質一般只在4-6個月了。當然隨著保護劑的不斷研發，隨著添加不同的保護劑，在4℃的環境下，某些液體產品的保質期可以達到15個月以上，有的可以達到兩年以上，但是所有的保存環境溫度都指向4℃，這對我們實際的銷售場景是不太相符的。當然，液體也有好處，菌種復蘇時間快，如果從實際銷售出發，建議在經銷點增設冷藏柜，這樣可以延長液體產品的保持期。 另外，就要談到目前大家所接觸比較多的蛭弧菌凍干產品了，尤其是強調蛭弧菌原裝凍干產品。在相關的研究中，4℃的環境下，添加了保護劑的蛭弧菌液體產品在13個月后其復蘇率為100%，而同樣的環境下，凍干產品在21個月后其復蘇率仍為100%。 而且真正的蛭弧菌原裝凍干產品，具有以下優點： 1.冷凍干燥生產工藝是在低溫下進行的，對于許多熱敏性的物質特別適用。蛭弧菌不會發生變性或失去生物活力，這一點非常重要。 2.整個冷凍生產過程基本上是在低溫真空狀態下完成的，在這種狀態下，微生物的生長和酶作用是受到抑制的，可以很好的保證蛭弧菌產品的穩定性。 3.因在真空下操作，氧氣極少，因此，一些易氧化的物質（如油脂類）得到保護。 4.冷凍干燥法能排除95%-99%以上的水分，產品能長期保存而不變質。 以上就是蛭弧菌凍干產品的優勢所在，也是其穩定性的保障所在。 水產前沿：蛭弧菌原裝凍干產品有什么特征？ 趙經理：市面上有很多處蛭弧菌凍干粉，有很多是呈現流動性粉狀的，也有一些是塊狀的，可能是生產工藝有所差別，但我們還是認為“原裝凍干”是一種最好的工藝，最主要是原裝凍干是在凍干機內完成封裝的，瓶內保持著真空凍干狀態，能最大可能的保存產品的活性，提供產品最好的穩定性，原裝凍干產品一般有以下幾個特征： 1.產品在小的西林瓶中呈現的是一種塊狀物，用手拿起瓶子晃動，感覺像一塊小小的泡沫，有很輕的感覺。另外，就是西林瓶裝的原裝凍干產品肯定不可能是粉劑。 2.原裝凍干和非原裝凍干產品在包裝上也有所差異，雖然都是西林裝封裝的，但是兩種產品封裝的瓶蓋都會存在明顯差異，主要的原因在于凍干的過程中需要做適當保護，不能直接將液體暴露在環境中，需要在西林瓶上進行遮蓋，但完全遮蓋是不行的，這會阻擋冰的升華，所以需要用一種帶導氣槽的橡膠皮塞進行半遮蓋，讓瓶內、外的空氣可以流動，不會阻擋冰的升華，而在一般環境下生產的產品是不需要用這種帶導氣槽的橡膠皮塞的，差異還是很明顯的，如下圖：
3.去掉西林瓶蓋上的塑料和鋁包片后，只留下橡膠瓶蓋的時候，用手拔出橡膠瓶蓋的時候，你會明顯的聽到“嘣”的一聲，可以看到凍干的塊狀物在瓶中的跳動，主要原因是原裝凍干是在凍干機中直接完成封蓋的過程，瓶體中是處于一種真空狀態。因此在拔出瓶蓋時，因為瓶內、外壓力的差異極大，空氣的快速流動引起了“嘣”的聲音產生，同時塊狀物會跳動。 4.極易吸水，1秒溶解。直接的表現就是將水倒進小瓶內，小瓶里的物料1秒就溶解完了，而且溶解均勻。實際上，這主要因為被干燥物料含有的水分是在凍結狀態下直接蒸發的，故在干燥過程中，水汽不帶動可溶性物質移向物料表面，不會在物料表面沉積鹽類，即在物料表面不會形成硬質薄皮，亦不存在因中心水分移向物料表面時對細胞或纖維產生的張力，不會使物料干燥后因收縮引起變形，故極易吸水恢復原狀。 如何合理使用蛭弧菌 水產前沿：請問蛭弧菌在水產養殖中如何合理應用呢？ 趙經理：任何一種產品要研究其如何應用，肯定是分兩個層面進行探究，一是要符合產品的基本特性，不能違背基本規律；二是在實際應用場景中，要和現實相結合，尋找最佳的使用方法。 我們首先要了解蛭弧菌的幾個特性：蛭弧菌的生長，一般要求pH6.0-8.5；溫度23-37℃，低于12℃，高于42℃時均不生長；能穩定分解蛋白質，一般不利用碳水化合物，而以肽、氨基酸作碳源和能源；能液化明膠；嚴格好氧。蛭弧菌的靶向性問題盡管并沒有很多的研究，但總體上其偏向革蘭氏陰性桿菌，只裂解較為少數的革蘭氏陽性桿菌。同時蛭弧菌的安全性也得到了一些論文的驗證，迄今為止，相關報道表明蛭弧菌對人和某些動物無毒害作用。 所以在實際使用中需要注意以下幾點： 1.溫度不在適宜范圍的時候，蛭弧菌生長是非常緩慢的，所以使用時要充分考慮這一點。比如3、4月份用它去泡苗，效果肯定不會好，但如果改成拌料投喂，則會對腸道控菌產生積極影響。總體來說，蛭弧菌使用主要分為內服和外潑兩個方面，內服不受溫度限制，而外潑則要考慮溫度問題。 2.蛭弧菌的繁殖需要氧氣，建議在早上8-10點使用。這樣可以獲得較為充足的溶氧。另外，其耗氧不會達到非常劇烈的程度，因為其繁殖代時一般要4-6小時。 3.蛭弧菌的安全性應該如何得到最大化的利用呢？實際上，我們重點推薦在甲殼類動物脫殼期使用蛭弧菌產品，因為甲殼類動物在脫殼期是非常虛弱的，也極易被一些有害菌感染，控菌工作非常重要，但是一些化學消毒劑存在刺激性，同時來的快、去的快，意義不大。而蛭弧菌則完美的解決了這個問題，其幾乎沒有刺激性，控菌時間又長，只不過要求我們需要提前2-3天使用即可，如果在使用補鈣制劑后再使用蛭弧菌，可能繁殖效果會更好，控菌效果也會更明顯。 4.配合化學消毒劑控制暴發性疾病。在5-8月份，往往有一些季節性暴發的疾病，存在著難治療、易反復等特點，這個時候可以將化學消毒劑與蛭弧菌配合使用，因為蛭弧菌在這方面有自己的特性：其見效慢，但見效長——見效慢是因為剛繁殖的時候，蛭弧菌需要時間，一般是24-48小時才見效；見效長，則是在很多研究中都指明，蛭弧菌控制有害菌的時間可以長達15天左右。因此，當使用化學消毒劑見效后，在12小時以后即可使用蛭弧菌類產品，每天一次，連續2次左右，這樣水體的短期、長期控菌就可以做到更好。 5.定期預防應該如何使用？定期預防幾個關鍵問題，比如能不能和其他微生物一起使用？多少天使用一次？在上面蛭弧菌的特性中，我們談到其偏向革蘭氏陰性菌，相對裂解較少的革蘭氏陽性菌。 實際上徐琴等人（2009）的研究指出，加噬菌蛭弧菌和黏紅酵母組的試驗效果不理想，表明這兩株菌體之間有一定的拮抗作用。而聯合使用噬菌蛭弧菌和球形紅假單胞菌（是紫色非硫光合細菌紅假單胞菌屬的一個種）組展示了凈化水質，預防病害的優良前景，此組能有效地吸收氨氮、硫化物等有害物質。這也指出了蛭弧菌是直接可以和某些光合細菌直接混合使用的，這一點大大提高了使用的方便性。 另外，陳家長等人（2003年）曾在螃蟹養殖中，間隔使用光合細菌和蛭弧菌：每20天用噬菌蛭弧菌和光合細菌各1次，使用方法為使用光合細菌1周后使用噬菌蛭弧菌，實驗周期3個月。其中蛭弧菌濃度為107cfu/mL，光合細菌為109cfu/mL。這樣間隔使用的效果也非常不錯，25d后養殖中華絨螯蟹驗組比對照組池塘中的細菌總數少2個數量級，70d后實驗組比對照組池塘中的細菌總數少3個數量級，另外試驗池塘的COD、氨氮及硫化物有明顯的降低，有效的提高了中華絨螯蟹的成活率，但是本文并沒有探討如何混合使用。 總體來說，如果出于預防考慮，和其他微生物可以間隔使用，這樣最最安全。當然如果真要混合使用，可以考慮和一些光合細菌配合，基本上不要考慮酵母或乳酸菌的混合使用了。 另外，間隔使用的話，可以考慮上邊陳家長等人的方案，即7天用一次其他有益菌，之后再使用蛭弧菌，14天之后再用其他有益菌——形成一個使用循環，效果更佳。 結語 國內發酵蛭弧菌的公司本身就不是很多，同時擁有大型凍干機的公司更是少之又少，新的經過多年的摸索，完成了蛭弧菌制種、發酵及凍干的全生產過程，能為客戶提供真正的蛭弧菌“原裝凍干”產品，同時做到質量可靠、效果穩定，同時竭誠歡迎新老客戶垂詢和參觀指導。 公司名稱：南京新的生物制品有限公司 公司地址：江蘇省南京市江寧區淳化街道 聯系人：趙經理13813362881(微信同號) |
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