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EMS病原或為罕見副溶血弧菌

2013-5-24 09:06| 發布者: 一片云| 查看: 68050| 評論: 0|來自: 中國水產頻道

摘要: 美國亞利桑那大學對蝦病害頂尖研究專家DonaldVLightner教授在稱EMS病原是一種罕見的副溶血弧菌,中國國內部分對蝦專家對其感染機理的說法仍持觀望態度,一切有待Lightner教授公布其實驗報告來詳細解釋。5月1日美國亞 ...
  中國水產頻道獨家報道,美國亞利桑那大學對蝦病害頂尖研究專家DonaldVLightner教授在稱EMS病原是一種罕見的副溶血弧菌,中國國內部分對蝦專家對其感染機理的說法仍持觀望態度,一切有待Lightner教授公布其實驗報告來詳細解釋。
  
  文/圖水產前沿》撰稿人 蔡章潔
  

 

EMS病蝦

  5月1日美國亞利桑那大學對蝦病害頂尖研究專家DonaldVLightner教授在GAA上稱已發現EMS(早期死亡綜合癥)的病原是一種罕見的副溶血弧菌,因噬菌體感染該副溶血弧菌并引起其釋放強的毒素。該細菌經口傳播并定植在對蝦消化道,產生毒素引起組織損壞,并造成對蝦肝功能紊亂及消化系統障礙。
  
  筆者就此采訪了多名對蝦學術專家、技術服務人員,更多的人傾向于認同Lightner的觀點,與弧菌相關并且具有中毒表現,但是具體的實驗數據支持尚有待Lightner本人解釋。而黃倢則認為EMS病因是YHV新型病毒,弧菌是繼發性感染。
  
  EMS(EarlyMortalitySyndrome)一般譯作早期死亡綜合癥,多發于蝦苗放養7-30天,患病對蝦體色呈白濁并微紅,多數情況下肝胰臟異常腫大,質地松軟,顏色呈淡白或淡黃色;部分患病對蝦的肝胰臟明顯萎縮,質地變硬。發病期間,患病對蝦通常在池塘水面緩慢游動或趴伏于池塘邊坡上,失去食欲,胃、腸充塞度極差,嚴重者胃腸呈紅色。該病病情發展十分迅速,死亡率和排塘率極高,從發現少量病蝦到排塘,時間最短的僅2-3天。
  
  Lightner教授表示,EMS與AHPNS(AcuteHepatopancreasNecrosisSyndrome,急性肝胰腺壞死綜合癥)是描述同一種疾病。而肝胰腺壞死癥(俗稱“偷死病”)是多在養殖到60天以后發生的,多發生于高密度養殖環境,相對比較高溫的地區。
  

  


  何建國:EMS發病癥狀更似中毒
  
  對蝦發生EMS病害之后死亡速度之快,超出了病毒和細菌性疾病的研究速度,就其發病特點來看更像是中毒癥狀。
  
  “就目前的研究來看,并不能否定他的觀點。而就他所發表的結果看,與我們2010年傾向于認為中毒的觀點也一致,但是他所認為的中毒方式我們也沒有做過研究,不能否定他的觀點。”何建國表示,對蝦發生EMS病害之后死亡速度之快,超出了病毒和細菌性疾病的研究速度,整體來說比較傾向兩方面的原因,一個是副溶血性弧菌致病,第二個更傾向于中毒,引起中毒的因素可能與種苗質量的抗逆性下降有關,2010年對蝦EMS發病有兩個特征,一是,與土苗相比,進口一代苗發病幾率大;二是,藍藻成為優勢種。
  
  何建國表示,Lightner教授的報告出來之后,會做驗證性實驗,如果他的觀點不成立,也會原先的研究方向,沒有影響。如果他的觀點成立,有兩個比較淺顯的問題需要考慮,一是,這種罕見的弧菌來源是哪里?是什么途徑造成了中國以及東南亞地區的病害?二是,這種毒素是不是只對小蝦有作用,如果產生的毒素的毒性如此之強,并且經口傳播,到養殖中后期是否會大量死亡?
  
  但是從對蝦產業發展來考慮,更多的應該尋找檢測以及防治辦法。何建國建議農業部加強進口親蝦的檢測,如果在親蝦中發現WSSV、弧菌和YHV,則堅決不予進口。養殖上消毒要徹底,如果真的如Lightner所說,噬菌體侵染弧菌而引起產生的毒素,那么早期消毒的時候將池底消毒干凈,噬菌體也可以被殺滅。兩個措施防控之下,就算有弧菌也沒有噬菌體,有噬菌體也沒有弧菌,就構不成病害。
  
  目前采用了許多殺滅弧菌的方式,但是還是不斷在發生弧菌病害,對此,何建國表示,這主要是因為具有抗藥性的細菌不斷增多,“在偷死病的研究中,我們用6種抗性基因分別檢測分離鑒定菌株攜帶情況,總檢出率高達80%,其中氟喹諾酮類抗生素檢出率達17.0%,而養殖中所用的環丙沙星就屬于此類,因此抗生素在預防上作用不大。”
  
  那么消毒為什么沒有作用呢,因為我們現在消毒劑多采取水體潑灑的方式,而蝦是在底部生活的,因此,一定要有底部消毒(筆者注,期間何建國多次強調一定是針對池底的消毒),用顆粒狀二溴海因拌上干砂、干泥土投放水中,10-13天消毒一次,二溴海因是對蝦類藻類刺激小,并且是微溶于水,會慢慢釋放。
  
  “2011年、2012年對蝦的主要病害依舊是偷死病和WSSV。消毒加生物防控基本可以應對偷死病和病毒病。”何建國說,現在生物防控效果不好,主要有兩個原因,一是一旦同時發生偷死病和病毒病,魚類不會選擇性攝食,發生偷死病和白斑綜合癥的一律攝食,因此徹底消毒控制好偷死病也是生物防控的基礎;二是,養殖戶在真正實踐的時候并沒有按照我們的標準放養。
  
  何建國透露,近期的研究中,在對蝦體內發現另外一種細菌,這種細菌是用于殺滅昆蟲的,昆蟲和對蝦都是節肢動物。但是關于此細菌的研究,目前還在進行中。
  

  


  黃倢:新型YHV或是EMS元兇
  
  這一基因型與現已發現的YHV的6個基因型均不相同,而在OIE水生動物診斷手冊中的YHV檢測方法對該毒株的檢測靈敏度很低。
  
  “在我們的研究中,從多地患EMS/AHPNS的對蝦中都檢出了此前從未檢出過的黃頭病毒(YHV)一個株型,這一基因型與現已發現的YHV的6個基因型均不相同。”中國水產科學院黃海水產研究所研究員黃倢認為這個新基因型的YHV有可能是這場病的元兇。
  
  據黃倢介紹,這一基因型與現已發現的YHV的6個基因型均不相同,而在OIE水生動物診斷手冊中的YHV檢測方法對該毒株的檢測靈敏度很低,甚至檢測不到陽性。2006年澳大利亞學者從泰國的凡納濱對蝦中分離的一株高毒力的YHV的一個基因片段的缺失在此基因型中也存在,這說明這個基因型對凡納濱對蝦可能具有較高的毒力。在感染實驗中,患病蝦勻漿液經微孔濾膜過濾的濾液能導致健康對蝦在數天內死亡,表明存在病毒的感染。
  
  目前實驗團隊正在對不同地域的YHV毒株進行基因組測序,初步的測序結果表明,我國檢出的該毒株存在明顯的變異,這可能與凡納濱對蝦不斷地引種有關。
  
  該病毒去年已向農業部報告,農業部已于去年年底向OIE進行了通報。目前黃海所的實驗團隊正在研發高靈敏度的檢測試劑盒,研發工作已接近實用化,有望生產上只需簡單的水浴鍋或恒溫器在1-2小時內就能高靈敏度地對該病原進行檢測。但其靈敏度和對不同地理株的適用性等相關工作還有待于進一步驗證和完善。
  
  黃倢的實驗團隊也曾在2010年從北海發生的EMS/AHPNS的病蝦中就分離到了一株毒力高、抗藥性強的副溶血弧菌,但他們懷疑該病原可能是繼發感染。針對Lightner教授的觀點,黃倢表示,“Lightner在原來的EMS/AHPNS病理學分析中認為細菌是二次感染,現在他們的研究認為噬菌體感染的副溶血弧菌是該病的病原,這個結論需要更多的分子流行病學證據的支持。
  
  總體來說副溶血弧菌的存在可能比較廣,是否這種情況都能導致EMS/AHPNS這還需要時間來檢驗。”
  
  “當然,還有可能是這場病是由多種不同的原因引起的不同的疾病,我們最近在病理上注意到無菌的YHV感染的肝胰腺的病理特征和有菌感染的肝胰腺的病理特征存在差別,而這兩種特征都包括在Lightner所描述的AHPNS的病理特征之中。”黃倢表示,在病害發生的初期,各種病因可能都會引起人們的關注,而隨著研究的深入,流行病學信息全了之后,事情就會慢慢變得清晰。
  

  


  賴秋明:綠色弧菌毒力強
  
  綠色弧菌在養殖水體中均可經口感染對蝦的消化器官,并可在對蝦的消化器官中定植并生長繁殖,并且綠色弧菌比黃色弧菌具有更強的毒力。
  
  “Lightner教授的研究團隊已確認EMS的病原是一株特異的副溶血弧菌,我很認同這個觀點。2012年11月在寧波舉辦的蝦蟹養殖研討會上,我已談到這個問題,根據我們這兩年的實驗研究和生產驗證,我還是堅持原來的觀點,認為一株變異的副溶血弧菌是引發對蝦EMS的主要原因。”賴秋明依舊持原來的觀點,認為所分離出的綠色弧菌是主要原因。
  
  賴秋明實驗團隊從患病對蝦的肝胰臟分離出一株弧菌優勢菌株,在TCBS培養基上其菌斑的顏色呈綠色,在實驗室條件下,以該弧菌菌株不同梯度密度感染南美白對蝦。只要水中綠色弧菌的接種密度為2.5×104cfu·mL-1時,10天內的累計死亡率達到98%。死亡對蝦的外表癥狀與“早期死亡綜合癥”基本一致,并從死亡幼蝦的肝胰臟檢測到大量的綠色弧菌。綠色弧菌在養殖水體中均可經口感染對蝦的消化器官,有很強的感染能力,并可在對蝦的消化器官中定植并生長繁殖。筆者認為綠色弧菌比黃色弧菌具有更強的毒力。并且,人工感染試驗是在實驗室的條件下進行,由于受光照的限制,養殖水體中沒有藻類,說明在沒有藻類存在情況下,對蝦同樣會出現“早期死亡綜合癥”的癥狀。(詳見本刊85頁《南美白對蝦EMS發病特點及防控》)
  
  往期相關報道
  
  《泰國對蝦首席DrChalor談蝦病》(《水產前沿》5月刊)
  
  《聚焦對蝦病害,或非病毒致病》
  
  (《水產前沿》2012年10月刊)
  
  《GAA:EMS病原已被證實》
  
  中國水產頻道每日頭條
  
  何建國建議的生物防控技術放養標準如下:
  
  草魚生物防控技術:適用于對蝦養殖密度5-8萬尾/畝,在鹽度8‰以上的水域,放養1kg左右的草魚,30-50尾/畝,對蝦養殖到10-20天就放草魚。
  
  革胡子鯰生物防控技術:鹽度6‰以下水域,放養250-500g革胡子鯰,40-50尾/畝。
  
  美國紅魚生物防控技術:對鹽度沒有限制,適用于蝦苗放養密度5-8萬/畝,放養60g左右的美國紅魚,50尾/畝,在放蝦苗20天之后放紅魚。
  
  石斑魚生物防控技術:針對日本囊對蝦尤為有效,對別的蝦不如日本囊對蝦明顯,石斑魚最好是200g以上,放50-60條/畝。
  
  軍曹魚生物防控技術:15尾/畝,不能放多,放養體長為15cm左右的軍曹魚。
  
  同時,防止偷死病、細菌病以及其他附著生物,最好搭配養殖吃碎屑和藻類的生物,高鹽度地區可放養籃子魚苗,200-300尾/畝。低鹽度地區放羅氏沼蝦,30-40%的羅氏沼蝦搭配60-70%的凡納賓對蝦,并且在放養羅氏沼蝦40天后再放凡納賓對蝦。
  
  
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