譯/《水產前沿》 鐘綺文 盡管1-單甘脂前途光明,但仍有很多未知,需要養殖戶參與更多的研究試驗。 圖1 滲透壓休克(即內穩態受破壞)后膜復原情況 全面解讀 盡管目前還在調查與AHPN密切相關的多個病原體,但主要致病菌是帶毒力的副溶血性弧菌株(Vibrio parahaemolyticus)。這菌株與霍亂弧菌(V.cholera)和哈氏弧菌(V. harveyi)相似度極高, 這給研究開了頭,找尋解決方法。 副溶血性弧菌可以通過許多不同的載體來傳播,例如浮游動物、浮游植物或池塘有害殘留物。蝦的含幾丁質的外殼也被懷疑是弧菌的攜帶者。因為涉及到很多載體,而且弧菌給池塘生態系統的一些有機物也帶來好處,沒有必要也不可能根除弧菌。 要解決像AHPN這樣復雜的問題需要一個全面的方法。盡管對它的基本機制還只停留在表層理解,但在大家緊密合作下相關知識迅速積累。采用一個整體方法來關注蝦塘中較低感染濃度的載體,阻止其在養殖對象中形成群體,但能中和副溶血性弧菌產生的毒素并恢復平衡,降低AHPN的影響。 另一種推薦用于阻止AHPN的方法是在細菌生物膜包裹細菌之前在蝦胃壁里破壞它的結構,因為生物膜能保護細菌免受抗菌化合物的傷害。有研究認為投喂1-單甘脂通過阻止入副溶血性弧菌的繁殖,進而能抑制群體形成。還有已知有乳化性能的特定單甘脂,可以在生物膜初期增加滲透性。我認為這樣的組合是1-單甘脂抗AHPN的力量。 1-單甘脂的影響 圖2 副溶血弧菌對食用含干制或液態1-單甘酯的蝦的存活率實驗結果 圖3 使用含短鏈和中鏈1-單甘酯配方的蝦的死亡率實驗結果 1-單甘脂基于一種能酯化在甘油分子中阿爾法位置脂肪酸的新技術。結果得出一個有特殊結構的新分子,既不是一種脂肪,也不是一種酸。這些分子無腐蝕性,有各自獨立工作的pH值,還有好的熱穩定性,這得益于核心部分的共價鍵。這都使得這些分子適合添加到飼料。 這么多年來,1-單甘脂的抗菌性和抗病毒性均影響著人類制藥業和動物繁殖業。它們并不歸類為抗生素,因為確切來說,這些分子并沒有殺死病原體。1-單甘脂阻止細菌獲得能量和水,所以基本上是把細菌餓死。 由荷蘭Framelco的研究發展部門和里斯本大學制藥學院一起進行基礎研究,并發現1-單甘酯能通過改變細菌膜的穩定和屏蔽膜中具促進吸收的水通蛋白3(AQP-3),從而影響細菌的內穩態(如圖1)。 1-單甘酯配方 在泰國測試了兩種類型的配方:一種是含有短鏈1-單甘酯,另一種是含有短鏈和中鏈1-單甘酯。兩種配方都以干粉的形式來測試,用載體以噴涂方式加入至蝦料。挑選出5個蝦場做實驗,兩個經常出現AHPN復發問題,兩個偶爾會出現這樣的問題,一個蝦場沒出現AHPN記錄。 從一個完整生產周期的結果來看,配方中含短鏈和中鏈1-單甘酯的表現更好:死亡率明顯下降,沒必要提早收蝦。之前經常出現AHPN復發問題的兩個蝦場,其結果顯示養殖周期里沒有AHPN出現。但在一些蝦塘中,蝦的表現還是不理想,這可能暗示當前環境中還有較高病原體進入,使健康情況受損。如果是沒發生過AHPN的池塘,蝦的生長情況更好,雖然不是很顯著地體現出來。 另一個結合實驗室和細菌內穩態的實驗確立了短鏈和中鏈1-單甘酯間的協同關系,弧菌實驗中添加短鏈和中鏈1-單甘酯的蝦料來投喂與只用單一短鏈或中鏈1-單甘酯的蝦料比較,結果顯示前者比后者的死亡率下降了16%。 后續研究 即便改良了配方,最初全面防控AHPN的試驗與其后續實驗的結果度不可能完全一致。通常可觀察到死亡率下降了20-30%,有些地方的死亡率甚至沒有。 小規模的實驗顯示,投喂富含1-單甘酯鹵蟲的蝦,其組織在瓊脂培養中有強烈的轉變,從綠色群體轉為黃色群體。短鏈1-單甘酯的水溶性和把配方與顆粒料結合的難點可能可以解釋這不連續的結果。 更多的研究需要增加1-單甘酯的潛能。在越南水產研究所的大規模試驗,發現在制粒前把1-單甘酯分子與粉料混合,這樣飼料的效果更為一致。 實驗表明用含1-單甘酯蝦料投喂的蝦在生長和存活率方面都比對照組表現好,但也發現某些情況下,外在消極因素,如氣候和水質的改變,會使分子的能力失效。 還有額外調查1-單甘酯對抗生素的影響,一個實驗組持續使用1-單甘酯的飼料,在發生AHPN早期使用了短期的抗生素來治療,這實驗組的蝦與只用抗生素治療的對照組以及沒有使用抗生素或1-單甘酯治療的空白對照組的蝦來對比。結果顯示,飲食中含1-單甘酯的實驗對象更容易接受抗生素的治療。在接受1-單甘酯和短期抗生素治療的實驗組中,蝦均健康并達到收成大小,而僅用抗生素治療的需要提早收蝦,空白對照組的結果最差。 從這實驗中提出了1-單甘酯抑制膜的產生,并在藥物治療中把有害的細菌更好地暴露出來。很多國家地區禁止使用抗生素,但沒有這些化學物質的情況下我們需要一個方法。 生物藥效率:1-單甘酯是干劑還是液體? 在研究加強1-單甘酯效果的方法里,Donald Lightner博士主持的一個由亞利桑那大學獸醫科學和微生物學聯合完成的實驗中,使用含有幾種1-單甘酯和微量成分的飼料,干制配方和液體配方都被測試了。為避免受缺失外部易變因素的影響,以高感染率來進行實驗。 意想不到的結果出現了,由于在高感染率的情況下,以干制1-單甘酯配方為食的蝦因AHPN,全部在3天內死了;但以液態配方投喂的蝦,一直與AHPN抗爭著,直到實驗結束,還保留有93.3%的存活率(如圖2)。 在人類或家禽,1-單甘酯通常依附于分子到載體都常應用在干劑形式;消化道內,1-單甘酯從載體中釋放出來,然后發揮它抗菌能力。 總結得出,飼料快速通過蝦體,使得分子不能完全發揮作用,因此減弱了它們的生物藥效率。這可能可以解釋早期實驗中的不足。 液體配方與陽性對照組的表現相比能減少80%的死亡率(見圖3),蝦體一天進食的食物里,其中液態1-單甘酯占0.8%。在這些實驗組里,蝦死亡率表現在6.7%,但經過檢查后發現,這些蝦體的死亡并非因為AHPN,更像是因為自相殘殺。 亞利桑那大學水產病害實驗室對樣品蝦進行組織學分析,發現投喂液態1-單甘酯的蝦,其感染率顯著下降。完全根治副溶血性弧菌是不可能的,但在實驗期間蝦體中有少量的細菌是不足以導致AHPN的發生。 一些實驗正在調查液態1-單甘酯的長期影響,初期數據顯示出一個光明的未來,目前大部分池塘沒有AHPN要爆發的跡象。在感染嚴重蝦場的池塘,不能每次都阻止AHPN的發生,但會推遲幾周。 中國水產頻道獨家報道,轉載請說明出處《水產前沿》雜志 www.fuqitext.com ,違者追究法律責任, 謝謝合作。 【關鍵字】:1-單甘脂 EMS 對蝦 水產養殖 |

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