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羅竹芳:AHPNS最嚴謹?shù)难芯拷Y(jié)果

2014-12-10 07:59| 發(fā)布者: syusuke| 查看: 113932| 評論: 0|來自: 中國水產(chǎn)頻道

摘要: 說起羅竹芳教授,或許有的朋友要懵了。羅竹芳教授是臺灣大學生命科學學院院長,擅長病毒分子生物學、甲殼類病毒學的研究。此前國內(nèi)企業(yè)從臺灣引進的白斑病的快速檢測方法也是源于羅竹芳教授團隊。
  說起羅竹芳教授,或許有的朋友要懵了。羅竹芳教授是臺灣大學生命科學學院院長,擅長病毒分子生物學、甲殼類病毒學的研究。此前國內(nèi)企業(yè)從臺灣引進的白斑病的快速檢測方法也是源于羅竹芳教授團隊。
  
圖為羅竹芳教授在第九屆世界華人蝦蟹養(yǎng)殖研討會上作報告
  
  文/中國水產(chǎn)頻道 蔡章潔
  
  中國水產(chǎn)頻道獨家報道,前兩天在lightner的文章中已經(jīng)說過PirA和PirB是在副溶血性弧菌的質(zhì)體基因中編碼的毒素蛋白。羅竹芳教授2013年9月開始參與AHPNS的研究工作。此后,組織開展了特異性基因比對開始的工作以及毒素的后續(xù)研究工作。此文,針對羅竹芳教授目前的研究進展進行解讀。
  
  首先,需要明確的一點是,此文討論的AHPNS為Acute Hepatopancreatic  Necrosis Syndrome(急性肝胰腺壞死綜合癥),而EMS(早期死亡綜合征)則為更廣泛的概念,AHPNS屬于導(dǎo)致EMS中的一種新病害,其主癥狀為對蝦肝胰腺上皮細胞大量脫落等(具體內(nèi)容參考Lightner的論文)。
  
  進展1 證明PirA和PirB是導(dǎo)致AHPNS的病原
  


  羅竹芳教授發(fā)現(xiàn)副溶血性弧菌質(zhì)體pVA1上編碼的PirA和PirB毒素的基因片段,并證明PirA和PirB毒素是導(dǎo)致AHPNS的病原。
  
  從圖片中可以看到,左上角的圖片為健康的對照組,右上角為單獨的PirA感染對蝦導(dǎo)致對蝦肝胰腺細胞間出現(xiàn)一些“小泡”,并無較明顯癥狀;左下角為單獨的PirB感染對蝦,發(fā)現(xiàn)對蝦肝胰腺上皮細胞出現(xiàn)大量脫落,與AHPNS癥狀吻合度極高;而使用PirA和PirB同時感染時,則出現(xiàn)了AHPNS。
  
  目前,對PirA和PirB的作用機理尚不明確,PirA可能是起某種調(diào)控作用。
  
  進展2: 為什么之前一直難以完成毒素的分離驗證實驗?zāi)兀?/b>
  
  在副溶血性弧菌的質(zhì)體上有一個致死基因,一旦將質(zhì)體“拿出”副溶血性弧菌,致死基因就會“殺死”副溶血性弧菌。這也是原先的病理驗證實驗比較難突破的地方。
  
  進展3 :已分離出預(yù)防AHPNS的抗體
  
  目前羅竹芳教授已經(jīng)可以制造出Pir毒素的抗體IgY,這種抗體是通過注射到雞體內(nèi)獲得的,屬于對蝦的被動性免疫,可以在AHPNS病發(fā)之前拌料投喂。作用主要是與Pir毒素結(jié)合,起中和作用,目前這個抗體還處于定量研究階段,以及成本降低階段。預(yù)計這種抗體使用成本能夠下降到每公斤飼料使用0.1元臺幣的成本。
  
  另外,羅竹芳教授也在做別的一些方法抵抗AHPNS,例如阻斷毒素與抗體結(jié)合。
  
  進展4: AHPNS的PCR檢測已經(jīng)確定
  
  目前檢測AHPNS的手段最精準的是PCR檢測,在2013年底,羅竹芳教授已經(jīng)公布了AP1、AP2兩個檢測序列,這兩個序列主要是檢測質(zhì)體的,使用質(zhì)體檢測只有98%的準確度。目前PCR檢測只能定性檢測,檢出量與發(fā)病之間尚未建立線性相關(guān)。
  
  不過在實驗室條件下,105cfu/ml副溶血性弧菌的水體中浸泡對蝦20-60min,再放到20L的水體中養(yǎng)殖,對蝦會60-80%的致死率。
  
  進展5 :PirA、PirB的結(jié)構(gòu)和昆蟲毒素類似
  


  如圖所示,左邊為蘇云金芽孢桿菌Cry insecticidal 毒素的結(jié)構(gòu),右圖為PirA和PirB的結(jié)構(gòu)。兩者在蛋白結(jié)構(gòu)上相似程度很高,但是基因相似程度僅10%。蘇云金芽孢桿菌具有導(dǎo)致昆蟲致死的功能。
  
  另外,值得說明的是,在2014年第六屆中國對蝦產(chǎn)業(yè)發(fā)展論壇上,何建國教授也發(fā)現(xiàn)了蘇云金芽孢桿菌可引發(fā)對蝦AHPNS,昆蟲與對蝦都屬于節(jié)肢動物,極有可能是AHPNS的病原。

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