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聽課筆記 | 一文知曉小球藻培養與應用的那些事

2016-11-5 09:08| 發布者: 一片云| 查看: 98140| 評論: 0|來自: 中國水產頻道

摘要: 一位從事藻類教學與研究28年的在校老師,聽她說說小球藻的那點事:1、首先,從宏觀和微觀上講解藻類的基本概念,讓大家對藻類有新的認識;2、然后,詳細介紹小球藻的生物學,為小球藻的培養和應用奠定理論基礎;3、最 ...
  文/黑龍江生物科技職業學院范秀娟  中國水產頻道周雙艷整理

  中國水產頻道獨家報道,

  本文長度為6000字,建議閱讀12分鐘

  一位從事藻類教學與研究28年的在校老師,聽她說說小球藻的那點事:

  1、首先,從宏觀和微觀上講解藻類的基本概念,讓大家對藻類有新的認識;

  2、然后,詳細介紹小球藻的生物學,為小球藻的培養和應用奠定理論基礎;

  3、最后深入講解小球藻的培養與應用以及鑒別方法。

  注:互動交流部分感興趣的朋友們請點擊 http://www.fuqitext.com/thread-70068-1-1.html  進行查閱吧


  藻類的概述

  1、藻類的分類-------藻類通常分為11大類


  藻類的種類很多,通常有些藻類對水產養殖來說是有益藻類,而有些藻類對水產養殖來說是有害藻類,但是有益藻類與有害藻類不是絕對的,而是相對的。

  如綠藻類里面的小球藻、柵列藻、卵囊藻都是目前大量培養的藻類,而水綿、剛毛藻也是綠藻類的藻類,但它屬于青苔類,對養殖來說是有害藻類。

  又如藍藻類,大家一談到藍藻類的藻類都很恐慌,怕它大量繁殖產生危害,但藍藻類中的藻類也不全是有害種類,而有些藻類是有益藻類,如說螺旋藻。

  所以不能根據某一大類就斷定這些藻類是有益和有害,而是要根據具體的種類和數量來判斷,這就需要在顯微鏡下面鏡檢,首先介紹一下藻類的基本概念。

  2、藻類的基本概念


  藻類在顯微鏡下能夠觀察其形態、結構屬于微藻,主要有8大藻類,即綠藻類、硅藻類、藍藻類、裸藻類、甲藻類、黃藻類、隱藻類和金藻類。藻類是沒有胚胎,有葉綠素自養無根莖葉分化的葉狀體孢子植物。

  我們如何觀察這些藻類呢?

  3、藻類的宏觀特征:


 、俚谝皇强此

  通常一種顏色的水,并不是一種藻類,綠顏色的水它有綠藻,還有裸藻;黃顏色的水有金藻、甲藻、黃藻、硅藻;紅顏色的水有血紅裸藻、甲藻、殼蟲藻、席藻;藍顏色的水有微囊藻、魚腥藻。我們單純從水色來判斷這個藻相好不好是不科學的。

 、诘诙䝼判斷的標準看水華現象。

  水華有溶液狀(硅藻、綠球藻等非鞭毛藻)、云霧狀(隱藻、扁藻等鞭毛藻)、膜狀(微囊藻、魚腥藻等帶偽空泡)、塊狀(實球藻、團藻),這些宏觀現象包含有不同的藻類,所以根據水華現象不能準確的判斷藻類到底是哪一種。

  ③第三個判斷的標準用手觸摸,每種觸摸的感覺不一樣,它所含的藻類的品種也不一樣。比如不粘手不發粘的有可能是微囊藻和實球藻,沾手不易清洗的可能是魚腥藻和綠裸藻,光滑的可能是水綿,粗糙和發澀的可能是剛毛藻。

 、艿谒膫判斷標準用鼻子聞,聞水的味道,有刺鼻嗆味可能是微囊藻或者其它種藻類。

  以上都是可以用眼睛看,用手可以摸等宏觀的一些標準,但不能僅從宏觀上判斷某種藻類,而是要根據它的微觀鏡檢結構進行準確的判斷。

  4、藻類的鏡下結構

  藻類結構包含細胞壁、細胞質和細胞核。


  細胞壁通常有2種情況,一種是沒有細胞壁,另一種是有細胞壁。圖中的裸藻沒有細胞壁,圖中的硅藻就有細胞壁。

  細胞質內有色素、色素體、同化產物和鞭毛。

  色素成分的不同有葉綠素使得藻類呈綠色、黃色素使得藻類成黃色、藻膽素使得藻類成藍色或紅色。


  通常能夠看到不同顏色的水,就是由于它色素的不同,使得水的顏色的不同。所以從宏觀上看水色的不同只能是初步判斷大致是哪幾種藻類,但是不能準確判斷它具體是哪種藻類,而要在顯微鏡下看,通過檢查細胞的結構、從細胞壁、細胞質里面的特征來觀察鑒別它是哪種藻類。


  藻類由于它個體比較小,通常鏡檢的時候,用目鏡是10×和16×的兩種,物鏡是有4×、10×、40×、100×,也就是放大倍數最大640倍就可以了,而不用油鏡的100×鏡頭。

  5、細胞形態與體制

  藻類的形態多種多樣,每種藻類的形態不一樣,它的結構也是不一樣的,要從它的細胞質和細胞核以及細胞內的結構來判斷。


  藻類有單細胞、單細胞群體和多細胞。在顯微鏡下藻類形態多種多樣,要對照圖譜鑒別每種藻類,而不能僅從宏觀上判斷是哪種藻類。

  這就是我講的藻類的基本概述,給大家講一個概念性的東西。詳細知道有很多問題,以后我們可以再進一步交流。

  下面涉及到我們的話題,小球藻的培養和應用的問題。首先介紹小球藻的生物學

  小球藻的生物學特征

  小球藻是一種單細胞綠藻,屬于綠藻門、綠藻綱、綠球藻目、小球藻科、小球藻屬,常培養的有:蛋白核小球藻、橢圓小球藻、普通小球藻三種。市面上大家經常見到的小球藻多數是蛋白核小球藻和橢圓小球藻。蛋白核小球藻因為蛋白含量比較高,一般可以作為飼料,同時也可以作為一種調水劑。實驗研究蛋白核小球藻在高溫季節不是很穩定,橢圓小球藻相比蛋白核小球藻在高溫季節要穩定一些。


  小球藻在自然水體里面有很多,它可以生活在淡水或半咸水和海水里面。淡水的種類通常是在肥沃的自然水體和潮濕的土壤中,現在大規模的培養已經成功。

  小球藻是單細胞藻類,小型(2-12um)

  這張圖是蛋白核小球藻的圖片

  蛋白核小球藻是均勻、綠色的液體(第一幅圖),把它放到池塘外進行擴培,要看池塘內的條件,如果池塘里面有大量的原生動物、輪蟲、枝角類。首先要對池塘進行處理,不然小球藻下到池塘里面,就會被這些大型的動物吃掉。

  現在市面上有很多小球藻在出售,小球藻倒入池塘,能否擴培成功是一個很關鍵性的問題。

 、偈紫,產品本身是小球藻的種類,數量要足夠,活性足夠強。

 、诘诙靥了|的條件符合小球藻生長,還必須要有它的適當的肥料。就像我們種莊稼,種子撒上了,如果沒有肥料也不可能生長得很好,小球藻也是同樣的。一個小球藻在20個小時內能繁殖成4個,它是以4的n次方的速度生長,但是它同時需要有培養基。

 、坌∏蛟逶跀U培的時候它分海水種和淡水種,在鹽度不同的情況下使用的小球藻也不是完全一樣的。淡水種的小球藻放到海水里面,由于它滲透壓的不一致,它繁殖的也不可能好,有的小球藻放到水里面沒繁殖起來就是這個道理。一個朋友拿淡水的小球藻放到海水里,結果他來問小球藻怎么繁殖不起來呢?是因為淡水的小球藻放到海水里,由于小球藻在海水的滲透壓和淡水的滲透壓不同,所以小球藻沒能夠繁殖起來。(剛才我講的是三幅圖里面的第二幅圖。)

  第三幅圖是室內養殖東星斑的一個代表,它是利用小球藻的水進行養殖的。

  市面上一些廠家生產的小球藻產品

  到底哪個品種好與不好,產品質量如何?我們不能單從顏色上看,而要拿到顯微鏡下鏡檢,才能夠知道它到底是不是小球藻和它的活性如何。

 、傩∏蛟逶阽R檢下通常它是圓的(蛋白核小球藻),它的色素體我們能夠看到,如果它的品質好,它的色素沉淀會很好,如果色素沉淀得不好,說明它的活性就不夠好。

  我在實驗室曾經買了十幾個廠家的產品,有些廠家的產品在實驗室里面根本就繁殖不起來,它看著是綠色的,但是我們進行培養的時候培養不出綠色的小球藻,說明它的顏色雖然對了,但它不是小球藻,它可能是其它成分兌出來的。

  ②另外還有一些種類它是有小球藻,但他的種類和數量特別的少,也繁殖不好。小球藻的繁殖是要有一定的條件的。

  下面來跟大家說一下小球藻的繁殖到底需要什么樣的條件。

  小球藻的培養

  1.小球藻培養的物理條件

  蛋白核小球藻、橢圓小球藻都是無性繁殖,細胞分裂1個分裂4個,每20小時以4的n次方的速度繁殖,繁殖速度非常快;

  適合的溫度是20-36度,隨著溫度的升高,繁殖的速度逐漸加快;

  pH5.5-8.0,鹽度可以從淡水做到海水,實驗室做到40‰-50‰之間;

  光照條件:5000-8000lux。


  如何判斷光照強度?我給了一幅圖,圖上用32w的燈進行判斷,它的培養距離是30cm、20cm、10cm,當它距離10cm就是5000lux。

  設定的培養條件對養藻來說非常非常重要,我們根據不同地區,從南到北,由于當地的水質條件、環境條件、溫度的不一樣,培養的結果都不同。

  2、小球藻的生長模式

  小球藻的生長模式分為幾個階段,最開始的時候是延緩期,生長速度比較慢,然后進入指數生長期,再進行相對生長下降期,最后靜止期和死亡期。


  也就是說小球藻剛開始生長是比較緩慢的,它通常在第一天到第二天的時候長速很慢,而在第3天到第4天的時候進入了對數生長期,生長速度就很快,長到一定高峰時期,相對生長速度逐漸下降下來,然后就進入了死亡期,也就是說我們在培養藻類的時候如果控制不好進入死亡就產生倒藻。

  池塘中有時候藻類生長到最旺盛的時候最容易大量的死亡,就是出現了倒藻現象,它就進入了最后的時期死亡期。

  3、小球藻的培養

  小球藻的培養有三級培養。

 、僖患壟囵B是實驗室培養,藻種分離和藻種保存,通常一級培養是在實驗室做的。

  二級培養和三級培養是大家在室內外能夠進行培養的。

 、诙壟囵B,實驗室外培養,需要針對實驗室給出的藻種,摸索好當地的培養條件(水質、光照和營養條件)再進行。

  給出的兩幅圖片,第一幅圖片是實驗室培養,第二幅圖片是實驗室外進行二級培養,在培養的時候也要進行消毒、接種、設置培養條件、培養管理。

  ③第三級培養是工廠化的培養,大規模培養,這三幅圖分別是跑道池的培養、管道的培養和圓柱形的培養,這三種方式都是企業采用的培養方法。

  養殖戶如果想做的話,沒有大型的設備,可以采用簡易的設備或者池塘進行擴培。用塑料袋(苗種的那種塑料袋)或者用買那種大的塑料桶進行擴培,但是在外面擴培的時候一定要注意消毒徹底,不能有其它微生物的進入。


  4、藻類營養需求

  在進行培養的時候有了藻種,還需要營養,就像人每天要吃飯一樣,藻的培養需要營養。


 、贍I養成分一定要有碳源,在培養的時候通入空氣,空氣里面含有二氧化碳,通常含有1-5%的二氧化碳。培養基里有碳酸鹽,可以用小蘇打。

  ②第二種的營養是氮源,氮源可以是硝酸鹽、氨鹽和尿素,藻類的生長離不開氮元素,一般大多數單胞藻干物中含有7-9%的氮源。

 、鄣谌N營養是礦物質,藻類對礦物質的利用與植物一樣,但對鈣的吸收比較少,主要的成分是鉀、鎂、鈉、鈣、硫酸鹽和磷酸鹽。

 、茉谂囵B藻類的時候,通常把pH值調到稍微偏酸,避免鈣鎂和其它微量元素發生沉淀。

 、菀残枰砑右欢康奈⒘吭。

  ⑥最后還要添加一定量的維生素,通常有維生素B1和B12,但是維生素的量非常少,如果添加量大也繁殖不起來。

  我們在培養藻類的時候,添加營養基的時候要根據藻類的數量和種類選擇不同的營養基,而且營養基的量也不一樣,如果量大了,它也可能抑制藻類的生長,量少了也可能供不上藻類的生長,有一定的比例和要求。

  5、培養方法


  ①首先要選擇合適的培養容器,二級培養通常選擇小型的培養容器,三角錐瓶或者5L或者10L的桶,大規模培養要選擇大的容器,選好容器后要對容器進行消毒。

 、谌萜鞴ぞ叩南,消毒的方法有物理方法和化學方法

  物理方法是通過加熱消毒,加熱消毒可以直接用酒精燈,還可以煮沸消毒。

  化學方法,一般大容器采用化學方法消毒。常用的化學藥品有漂白粉、酒精和高錳酸鉀。

 、叟囵B液的配制:自己培養藻類通常配比不好培養基,一般選擇合適廠家的培養基,不同的藻種,去定制培養基。

  藻種有了,培養基也配制好了(有賣現成的培養基),就可以做二級培養了。

  6、接種

  ①藻種質量:一般要求選取無敵害生物污染,生活力強,生活旺盛的藻種培養。

  ②藻種數量:藻液容量和新配培養液比例為1:2或者1:3,一瓶的藻種可以接3-4瓶的藻量。二級培養和三級培養由于培養容器容量大,藻種供應有時不足,可根據具體情況靈活掌握,但最少不宜低于1:50。一般以1:10-1:20較適宜。如果藻量特別少,繁殖速度就很慢。

  ③接種時間:接種的時候要選擇上午的時間,最好在8-10點,不適合在晚上接種,晚上接種的成功比較低。

  藻種拿到以后,首先要拿出來讓它復蘇幾個小時,這樣接種效果相對好,接種量控制二級培養(1瓶接3-4瓶)。

  7、培養管理:

  我們做好了接種,那么就要對所做的培養進行管理。

 、僖粩嗟臄嚢韬统錃,通過攪拌或充氣增加水和空氣的接觸面,使空氣中二氧化碳溶解到培養液中,補充由于藻細胞作用對二氧化碳的消耗。幫助沉淀藻細胞上浮而獲得光照。

  防止水表面長出菌膜,攪動、搖動一般每天至少3次,定時進行,每次半分鐘,充氣可24小時連續充氣或間歇充氣。

  ②燈光的調節:極端易變是太陽光源的特點,必須根據天氣情況,不斷調節光照度。室內盡可能利用近窗口的漫射光,防止直射光照射,光照過強時可用布簾遮光調節。室外一般應有棚室頂架,用活動白帆布或彩條布蓬調節光照,陰雨天,可短期利用人工光照。光線太強對藻類生長不利,光線太弱對藻類生長也不利,要適合的光照,小球藻的適合光照在5000-8000lux,這是我們通過實驗室實驗總結出來的。

  ③溫度的管理:小球藻培養溫度最高在36度(海南),也做得非常好,生長速度很快,溫度越高生長速度越快,在溫度比較低的時候生長速度就比較慢,通常小球藻的培養生長周期快的時候4天,慢的時候應該在10天左右。

 、茏⒁馑釅A度的變化和二氧化碳的進入量,pH值太高對藻類生長也不利,pH值太低也不行,1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調節pH值。

  小球藻的應用

  小球藻的應用范圍很多,主要有6個方面:

 、偃芙庋醯闹饕獊碓矗锩嬗85%的氧來自藻類,所以外界的補充包括增氧機的和增氧藥不是主要的來源。②調節水質③作為餌料④肥料的應用⑤提高養殖動物的抗病能力⑥調節藻相,控制有害藻類。

  1、溶解氧的主要來源


  藻類的光合作用需要二氧化碳和水,在有光照的情況下,產生有機物,同時釋放出氧氣,所以藻類是水中氧氣的主要來源。藻類在進行光合作用的同時也進行呼吸作用。藻類產氧是光合作用,呼吸作用耗養。藻類的產氧大于耗氧,就是光合作用大于呼吸作用,只要有藻類的生長,水中的氧氣含量是逐漸增加的,而不是逐漸降低的,除非藻類倒藻,就只有呼吸作用,沒有光合作用。

  2、調節水質

  實驗發現小球藻對總磷、總氮、氨氮和COD值都有一定的改善,在48h之內總,總氮量、總磷量、氨氮量及COD值都逐漸降低。


  3、作為餌料

  小球藻作為餌料,由于小球藻有一定的蛋白質含量和含有一些其他的有益成分,所以小球藻被添加到飼料里面,但是現在小球藻培養的成本比較高,做飼料還是很少,當小球藻大規模生產成本降低,在飼料的應用就更為廣泛。

  4、肥料的應用

  小球藻由于含有很多有機成分,在處理養殖場時培養起來的小球藻被用作為肥料。


  5、提高養殖動物的抗病能力

  主要是小球藻含有CGF小球藻生長因子,它能夠促進組織修復,提高免疫力、抑制病菌的侵染,所以小球藻可以提高養殖品種的抗病能力,同時它的營養成分也比較豐富。


  6、可以調節藻相,控制有害藻類


  在水產養殖中,常見的有害藻類有藍藻、裸藻、甲藻、小三毛金藻和青苔。如果把小球藻大量繁殖起來成為優勢種,那么這些有害藻類就不能成為水體的優勢種,從而抑制有害藻類。今年我們在室外塘做過實驗,小球藻配合硅藻類使用,在室外塘有害藻類控制得非常好。小球藻在室內培養以后,在室外擴種,從海水到淡水,從東北一直到海南都做過實驗,成功擴培并控制有害藻類。

  小球藻的鑒別

 、偈紫葟念伾袛,小球藻顏色是墨綠色、綠色的,但不是絕對的,具體的顏色根據小球藻的數量而定。像第一張圖濃度就比較高,濃度在5000-8000萬/ml,第二張圖瓶中顏色比較淡,但它也是小球藻,只是它的濃度比較低。

  第二幅圖又兩個瓶子,一個瓶子里面是均勻綠色,另一個是是底下沉淀了。小球藻進入休眠狀態它就會沉淀,它處于生長階段是均勻的,藻液保存時間長了,處于休眠狀態它就會沉淀。但是小球藻的生存能力特別強,只要藻種好,它就不容易死。我們曾做過實驗,在室內常溫下保存了半年的藻都能正常繁殖的很好。

  第三幅圖,就是我們曾經買過的一瓶,這瓶樣品已經放了兩年了,始終顏色從來沒變過,還是這么均勻透綠。我買了兩瓶,其中一瓶用于繁殖,繁殖兩次都沒有繁殖起來,說明這個不是藻,所以說單從顏色上看我們判斷不出哪個質量好哪個質量不好,藻類是什么品種。

 、谖艺J為比較準確的標準就是鏡檢,做藻類一定要鏡檢。很多朋友沒有顯微鏡甚至也不會看顯微鏡,就做藻類,你做得好不好怎么判斷呢?沒有一個判斷標準。

  小球藻鏡下三幅圖,第一幅圖是小球藻的密度比較大,第二幅圖密度比較小,第三幅圖有集中有分散的,這三幅圖你一看都是小球藻,我們在顯微鏡下看到了小球藻,難道你能說它不是小球藻品種嗎?

  所以說判斷小球藻的好與不好,一方面從顏色上看是可以的,但不是絕對的,而要進一步進行鏡檢,才能判斷出來小球藻到底質量如何。

  【關鍵字】:小球藻   培養  應用   水產養殖
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