文/西南大學（榮昌校區）魚類繁殖與健康養殖中心 摘要：不同濃度條件下，試驗了過硫酸氫鉀對5種水產動物常見病原菌，包括柱狀曲撓桿菌、熒光假單胞菌、嗜水氣單胞菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌的藥物敏感性。結果表明：過硫酸氫鉀對這幾種病原菌的MIC為3.1——5.7mg/L之間，MBC為4.5——8.3mg/L之間。 1材料與方法 1.1材料 1.1.1菌種 試驗菌株選擇水產養殖魚類的常見致病菌，試驗菌株取自農業部漁業動植物病原庫。 G4柱狀曲撓桿菌Flexibactercalumnaris 56-12-10熒光假單胞菌Pseudomonasfluorescens ST78-3-3嗜水氣單胞菌A.hydrophilahydrophila 58-20-9副溶血弧菌Vibrioparahemolyticus BYK00056-11-24溶藻弧菌Vibrioalginolyticus 1.1.2試驗藥品 試驗藥品＂過硫酸氫鉀＂本試驗所使用的過硫酸氫鉀由連云港永榮生物科技有限公司提供，具體產品信息見表1。
1.1.3培養基 選用肉汁胨培養基：蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g，H2O1000mL，pH7.2——7.4，1.05kp滅菌20min。 1.2方法 1.2.1菌懸液的制備 將各菌株接種到已滅菌的培養基上，培養24——48h后刮取菌苔，置于無菌生理鹽水中搖勻，離心2次(4500r／min，每次20min)，收集沉淀，重懸于無菌生理鹽水中，參照麥氏比濁管將菌液稀釋到約107CFU／mL。 1.2.2藥液配制 過硫酸氫鉀用無菌水稀釋1000mg/L備用。 1.2.3抗菌效果試驗 1.2.3.1藥物敏感性試驗 藥敏試驗采用濾紙片法，根據抑菌圈的大小，來判斷菌種對藥物的敏感性，是敏感，中度敏感還是耐藥。干燥紙片的制備方法：選用吸水力強而且質地均勻的濾紙，用打洞機制成6mm直徑的圓紙片，120℃干燥滅菌2小時。然后把配制好的各種適宜濃度的藥液，每100張紙片加入1.0mL藥液，使它均勻浸潤，放在無菌平皿中，37℃使它干燥，分裝小瓶中并封口，4℃保存。采用平板擴散法將培養的試驗菌株以無菌水制成約106CFU／mL的菌懸液，移取100μL菌懸液至肉汁胨固體培養基上，推樣器推勻，稍干后鑷取無菌圓紙片貼放于接種過試驗菌株的平皿培養基表面，使每片含100μg的藥物，28℃恒溫培養24h后，游標卡尺測量抑菌圈直徑(鄭鈞鏞等，1989)，見表2。 1.2.3.2最小抑菌濃度(MIC)測定試驗 使用試管稀釋法。吸取預先配制好的藥物母液1mL，加入滅菌試管中，加無菌水至9mL，每一試管再移取菌懸液1mL(預先培養18h，濃度約為107cfu／mL)，混勻，28℃恒溫培養，24h后每管移取1mL至9mL無菌肉汁胨液體培養基內培養，肉眼觀察，含最小量尚呈明顯不混濁的試管所含藥物的濃度為最小抑菌濃度(MIC)，見表3，4。 1.2.3.3最小殺菌濃度(MBC)測定試驗 按液體培養基稀釋法的操作方法測了藥物的MIC，然后把未長出菌的各個試管培養液分別移種到無菌平板上，培養后凡是平板上無菌生長的藥物最低濃度就是最小殺菌濃度（MBC），見表4。 2結果 2.1過硫酸氫鉀對不同病原菌的敏感性 表1 不同細菌對過硫酸氫鉀的敏感性
注：S——敏感；R——不敏感。 2.2對幾株細菌的最小抑菌濃度（MIC）試驗 過硫酸氫鉀對5株細菌的抑菌試驗結果。“+/-”表示，2個平行組中1個為“+”、1個為“-”；“+”或“-”表示，2個平行組的結果相同，同為“+”或“-”，“+”表示有細菌生長，而“-”表示無細菌生長。每種病原菌的每個濃度梯度均設1個不加藥物的陰性對照，以便于區別渾濁是由細菌繁殖造成還是藥物本身產生的渾濁，抑或細菌由于其它原因造成了死亡（表2）。
2.3對幾株細菌的最小抑菌濃度（MBC）試驗 過硫酸氫鉀對柱狀曲撓桿菌等的MBC值見表4。  3結論 過硫酸氫鉀對水產動物常見病原菌有較強的抗菌力，過硫酸氫鉀對試驗的5種病原菌的MIC為3.1——5.7mg/L之間，MBC為4.5——8.3mg/L之間。 此試驗數據表明連云港永榮生物科技有限公司的50%片劑及粉劑在抑菌圈及最小殺菌、抑菌濃度上都表現了極好的效果，這也表明了復合過硫酸氫鉀配方的重要性。 如有相關問題，可咨詢連云港永榮生物科技有限公司趙經理15821078956。 【關鍵字】：過硫酸氫鉀 水產動物 病原菌 敏感性 水產養殖 |
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