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標題: 【在線交流】臺灣石斑魚疫苗研發之路@臺灣國立成功大學楊惠郎教授與網友在線交流 [打印本頁]
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-12 14:35
標題: 【在線交流】臺灣石斑魚疫苗研發之路@臺灣國立成功大學楊惠郎教授與網友在線交流
本帖最后由 Say-say 于 2012-3-21 16:20 編輯

獨家重磅推薦

臺灣石斑魚疫苗研發之路

@臺灣國立成功大學楊惠郎教授與網友在線交流


時間：1月16日 上午9點30分    地點：中國水產頻道 www.fuqitext.com


個人簡介：

水產前沿網

楊惠郎：國立成功大學農業生物科技中心研究教授

學歷：
美國加洲大學，戴維斯分校博士(Ph.D. 1972)
國立臺灣大學農化系學士(1966)

經歷：
Aug. 1, 2000- Sept. 2011
國立成功大學生物科技所特聘教授兼生物技術中心主任

Jan. 1998/1/23—July 2000
中央研究院生物農業科學研究所籌備處研究員

Sept-1991- Dec. 1997
財團法人生物技術開發中心  分子生物組主任

Aug-1994- 1998
國立臺灣大學獸醫系兼任教授
  
Sept.1990 - Aug.31, 1991
國立陽明醫學院客座教授  

June 1982 -- Feb. 1990
研發部主管
Managing director
Enzo Diagnostics Inc.,

Oct.1980 - May l982
Associate, Department of Genetics
The Public Health Research Institute in the City of New York  

Oct.1980 - May l982
兼任助理教授， 紐約大學醫學院
l977 - l980 副研究員，哥倫比亞大學

榮譽及獎項：

國內
1. 1992 行政院杰出科技榮譽獎
2. 2002 成大特聘教授(三次)
3. 2003 教育部產學合作獎:生物醫學項
4. 2006「李國鼎科技講座」-榮譽學者
5. 2007 生策會 國家新創獎 學術研究
6. 2008 經濟部-生物技術研發成果創意應用競賽金牌獎
7. 2009 臺南一中杰出校友獎-科技項
8. 2009 經濟部-生物技術研發成果創意應用競賽銅牌獎
9. 2011 臺北生技獎 產學合作項

國際
10.  2008 歐洲水產年會最佳壁報獎
11. 2009 發展中世界科學院農業科學獎 (2009 TWAS Agricultural Science Award )
12. Marques’ Who is Who in the world, 2010, 2011, 2012


水產前沿網
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-12 14:40
在前不久揭曉的2011'中國水產業十大年度人物中，楊惠郎教授被推選為“十大年度人物”之一

上榜理由：


2011年石斑魚NNV（腦神經壞死病病毒）口服疫苗的成功研發，給飽受病害之苦的石斑魚,尤其是育苗產業注入了一劑強心針，而研發團隊的領頭人，正是臺灣國立成功大學生物科技所楊惠郎教授。

NNV疫苗研發成功意義重大，NNV在石斑魚苗期感染具近100%致死率，被認為是國際養殖高價魚種中最棘手的病毒之一，楊及其團隊歷時8年，成功突破此口服疫苗關鍵技術，不但解決了國際石斑育苗病毒感染的產業問題，更是國際首次證明可在稚魚階段有效預防疾病的創新發明。在此之前，臺灣和大陸均無公開報道過此類成熟疫苗產品出現，楊也因此被稱為臺灣石斑魚疫苗領域的權威之一。目前楊及其團隊正將此技術應用于生產高抗病力石斑魚苗，以供石斑魚養殖戶使用。

可以預見的是，疫苗已被公認為是水產養殖病害防治最佳手段之一，楊的研究方向未來潛力巨大。無獨有偶，同樣在2011年，珠江水產研究所研發的草魚出血病活疫苗獲國家新獸藥證書，并拿到水產疫苗生產批文，成為大陸首個拿齊出生紙，可以商品化的水產疫苗。   


重要分享：


臺灣的水產養殖技術已有深厚產業根基，也一向是亞洲水產種苗的供應中心，暖水魚種之養殖技術領先國際，在以知識經濟為基礎的高科技時代，臺灣有機會可以成為國際暖水魚種養殖之技術中心。但也因臺灣的經濟特性，養殖業發展朝向密集養殖的模式，因此提早面臨疾病叢生、死亡率高、及藥物抗生素濫用的情況，恰正重蹈二十年前未科技化的挪威鮭魚產業，及四十年前之畜禽養殖個體小戶的產業發展歷史。

面對國際競爭，若不針對問題，主動積極根本解決，必會影響產品銷售，并導致水產養殖產業之萎退、外移的現況。嚴重地阻礙水產養殖產業的永續經營，及國際市場對臺灣產品的信心。于是我們認為，要提升臺灣水產養殖產業，必須以挪威之鮭魚產業發展針對冷水魚種之生物技術模式為借鏡，對暖水魚種導入養殖科技化的觀念與做法，暖水魚種雖然生長效率較冷水魚種高，但是在生長型態、環境、疾病分布上，都有很大的差異，因此疾病預防及治療的方法也不相同，可惜的是，至今仍未有暖水魚種完整的疾病防治系統。

若想要爭取此市場，就要以建立可解決瓶頸之科技為開啟市場之鑰匙。以生物技術來研發暖水魚種疾病防治之關鍵技術產品(疫苗及檢驗試劑)，并延伸用以生產高抗病力種苗(SPR: Special Pathogen Resistant)及整合工業化之養殖科技。生產高抗病力之健康種苗，則是國際暖水魚種水產養殖產業市場極需之關鍵產品，及轉型成工業化的水產養殖的關鍵。必定可以幫助臺灣掌握暖水魚種養殖工業的巨大商機。

作者: 水寶寶    時間: 2012-1-12 15:11
水產前沿網
楊惠郎研究團隊

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作者: syusuke    時間: 2012-1-12 17:56
期待中...
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-12 23:43
先與網友分享楊教授的論文一篇：

魚用疫苗及疾病預防系統之建立

楊惠郎
國立成功大學生物科技研究所
國立成功大學生科中心
水產疾病醫藥研究團隊


hlyang@mail.ncku.edu.tw



壹、 發展前景及瓶頸

1. 利用海洋生產高品質的漁貨將是國際最具發展潛力的民生產業

由於地球人口日益增加，而可用土地逐日萎減，糧食短缺已經是無可避免的全球重 大問題。地球70%之面積是海洋，人類民生必需之蛋白質食品勢必轉由海洋供應， 海面水產養殖產業將快速取代捕撈并成為主要的糧食及民生產品來源。據聯合國糧 食組織（FAO）資料顯示，水產養殖已是國際進展最快，且最具發展潛力之產業， 其優勢及情況略述如下：

‧ 海面養殖每平面單位之生產量可達陸地養殖之二十倍以上。

‧ 魚之養殖效率遠高於畜產，以最佳之飼料換肉率比較，魚可達0.8，而雞為1.5、豬為3.5、牛為7.0。

‧ 水產養殖業自1980年起年成長率高達10%，遠高於畜、禽產之養殖。FAO預計養殖魚獲將逐步取代捕撈漁業，於2030年其佔有率將由目前之30% 提升至50%。

更印証這發展趨勢的是，在2002年國際知名管理大師彼得‧杜拉克Peter F. Drucker 在其「下一個社會」 （Managing in the next society: Beyond the information revolution,  2002）一書中指出：
“同時毫無疑問的、預料不到的新產業會生現，其中一個已出現了，就是生物科技  產業，另一個則是養殖產業。今后五十年，養殖漁業可能會使人類放棄海上捕撈， 改為從事海洋畜牧，就像一萬年前，同樣的創新，使我們的祖先放棄陸上捕獵，變 成農民與牧人”。

依高科技產業之發展歷史模式，科技產業之發展端賴新科技之研發，掌握關鍵技術 者必是此新產業之領導者，在養殖漁業正從傳統走高科技化的轉捩點、科技化養殖 產業之發展亦必屬掌握關鍵技術者。

2. 疾病是水產養殖產業發展瓶頸及科技化養殖的關鍵因素

　　我國水產養殖技術基礎深厚，向來領先國際，尤其是暖水魚種海水養殖技術更稱霸 全球，是加入WTO后農業部門最具競爭優勢的產業。但傳統的水產養殖為了創造 經濟效益，為追求產量，使用高密度養殖所帶來的疾病問題，導致高死亡率，及不 能永續經營之后果，造成產業衰微，始終是國際間水產養殖無法克服的瓶頸。目前 除了鮭魚養殖以外，全球的水產養殖仍然無法脫離傳統漁作的窠臼，水產養殖疾病 防治新科技及產品，將是未來水產養殖產業是否能從目前的傳統產業模式，成功的 走向科技化、工業化之水產養殖產業之關鍵。
3. 疾病防治技術之突破所延伸的商機

在市場需求日殷之產業市場下，以生物技術研發暖水魚種疾病防治之關鍵技術產品 (疫苗及檢驗試劑)，以生產高抗病力種苗(SPF: Special Pathogen Resistant)；整合工  業化之養殖科技；掌握暖水魚種養殖工業的巨大商機。

冷水魚種之鮭魚養殖是目前全世界唯一徹底科技化、工業化的養殖產業。而挪威之 鮭魚產業從無，到掌握國際鮭魚市場，分析其中成功的因素，其發展模式就是以研 發鮭魚養殖科技為始，成功的疾病防治策略應是最大功臣，全球最主要養殖魚產來 源的暖水魚種，生長效率較冷水魚種高，冷水魚與暖水魚在生長型態、環境、疾病 分布上，都有狠大的差異，因此疾病預防及治療的方法也不相同，但至今仍未有暖水魚種完整的疾病防治系統。因之爭取此市場，就要以可建立解決瓶頸之科技為開啟市場之鑰匙。以生物技術來研發暖水魚種疾病防治技術及產品(疫苗及檢驗試劑)，生產高抗病力之健康種苗，則是國際暖水魚種水產養殖產業市場極需之關鍵產品及轉型成工業化的水產養殖的關鍵。

臺灣在水產養殖技術已有深厚產業根基，也一向是亞洲種苗供應中心，暖水魚種之養殖技術領先國際，在知識經濟為帥的高科技時代，臺灣應是可建立成國際暖水魚種養殖之技術中心。但也因臺灣地小，養殖業發展朝向密集養殖的模式，因此提早面臨的疾病叢生、死亡率高、抗生素濫用的情況，嚴重地阻礙水產養殖產業的永續經營，及造成魚貨殘含抗生素之品質問題。
此種暖水魚種之養殖以疾病多、死亡率高、未使用疫苗而導致抗生素使用過量、不當，抗生素之殘留污染品質等困難，恰正重蹈二十年前產業未科技化前挪威的鮭魚產業，及四十年前之畜禽養殖個體小戶的產業發展歷史。面對國際競爭，若不針對問題、主動、積極根本解決，必會影響產品銷售，并導至水產養殖產業之萎退、外移的現況。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-12 23:46
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-12 23:48 編輯

貳、 疫苗使用能提升存活率必會提升養殖利潤

我國近年來，無論本來覺得業者傲導國際之海鱺及石斑種苗之養殖，漸已面臨當年草蝦養殖之瓶頸：疾病導致高死亡率及不能持續生產之產業瓶頸，也使政府以水產品進軍國際競爭的政策，遭受重大挫折。雖眼看國際間良好的商機，但面對發展的困難，經營的虧損，養殖戶無能為力，漸失經營的信心。魚隻之死亡不但損失產量及養殖過程中之飼料之浪費，都造成生產成本之高升。以本實驗室依養殖期、飼料、魚苗及固定成本等參數，獲得海鱺養殖估算(圖一)，証明唯有提高養成存活率，才能降低成本，提升養殖利潤。


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參．完整之疾病防治之體系可提升養殖存活率

在現代疾病預防及治療醫藥中，無論是人類的健康保護或禽畜產的養殖，已証明最有效的疾病防治之體系，包含
  (1). 生長或養殖環境之營理，

  (2). 養殖動物之營養

  (3). 疾病之預防三大要件。

在疾病防治之體系之使用，則先以疫苗預防疾病，以檢驗試劑確定病原，再以對癥之醫藥(含抗生素)來治療疾病，這三大醫藥關鍵零組件之齊備，才能組合成為現代疾病防治之體系。在水產養殖之過程中，必需有適當的魚用疫苗可用來生產高抗病力之魚苗，以事先預防未可預測及突發的疾病；不同之檢驗試劑在病情初發期可快速確定病原及相關抗藥性，以對癥下藥并可檢測疫苗免疫之效用，抗病力之監控及作為魚苗品質之檢定；而醫藥可只使用於病原已確定、抗藥性已偵測過之細菌，作有效，正確的治療。此疾病防治系統已在人類使用多年、效果也証明良好。在畜產業上之使用也逐漸取代以抗生素預防疾病之劣習。魚產業中、挪威及歐美也沿用多年証明正確有效。但目前暖水魚種養殖上，疫苗及檢驗試劑之一併研發極為迫切，也只有這二件關鍵零組件之建立，方能配合醫藥來組合暖水魚種的疾病防治之體系。

肆、疫苗能大量減少或避免抗生素之使用: 挪威使用疫苗之范例

使用疫苗預防疾病除了在人類應用外，逐漸也推廣到其他動物之疾病預防，成果良好。疫苗已是人類，畜產不可或缺的預防醫藥。豬，牛，羊，雞，鴨等畜禽產及寵物用疫苗也是疫苗產業之重點。暖水魚魚病相當嚴重，但尚無疫苗、檢驗試劑之疾病管理系統。 我們最近看到水產品因含氯霉素在歐、美、日本退貨的消息，是否歐美日故意使用高檢驗標準來排斥外貨？也開始思考養殖是否可以不用抗生素？ 事實上，此一要求在畜產經營已施行多年，加上挪威養殖鮭魚使用抗生素情形，在1986-7年每噸魚貨尚用1公斤抗生素，致使抗藥性細菌之滋生，抗生素使用無效，還遭遇高死亡率。至1990年代開始使用疫苗預防疾病，而只用抗生素於疫病之治療。早自1996年時已達到每噸魚貨使用不到0.3 毫克，等於不使用抗生素之高水準。也看到鮭魚養殖產業不衰反進，由建立完整的鮭魚疾病防治之體系，促成鮭魚存活率之大量提升提升，養殖成本降低，挪威也成鮭魚年產值達50萬噸領先國際之養殖大國。這近二十年挪威養殖的成功經驗確實証明疫苗才是預防疾病的良方，在水產養殖業抗生素之使用應僅止於治療。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-12 23:49
伍、魚用疫苗及發展疫苗的困難

疫苗是使用抗原(antigen)在目標動物體中促製專一性被動免疫系統(specific adaptive immune system)、適時產生高量的專一性抗體(antibody)來預先提升動物之預防疾病之抗病力。

因之，一個成功有用的魚用疫苗不只是疫苗產品(抗原)而已，還包含劑型、佐劑、使用策略(方法及時間)四大要件，此些因素必需完整方能研發一件有效的預防疾病的疫苗。而且常因不同魚種養殖程序不同及疾病感染情況之不同，針對不同目標魚種建立最佳之使用策略(方法及時間)也是疫苗使用成敗之因素。反之、若只有疫苗而無使用策略(方法及時間)，疫苗常常并得不到預期之效果。

在魚的疫苗研發上，另一重要觀念是魚與哺乳動物免疫系統魚之免疫機制，免疫系統及免疫反應與哺乳動物不同之處，例如：

• 魚早在六億年前就存在，魚是首先有專一性被動免疫系統之動物，而一億四千年前才有哺乳動物。

• 目前大部份之魚只發現其一種免疫球蛋白IgM like，而人類有五種不同功能的免疫球蛋白。

• 魚之免疫記憶力短，常存在不到幾週。

• 魚之抗體製造力低。

• 甚至魚之抗體力價之高低，并不能直接代表抗病力之強弱，例如在鱈魚，免疫后有抗病力但抗體并不增加。

• 非專一性之免疫能力與專一性之免疫能力，在魚在抗病能力上皆有重要之角色。

有如上述原因，在發展魚用疫苗時，必需針對魚類免疫系統，先進行了解，方能研發有效之疫苗。切忌盲目延用哺乳動物之免疫知識。
陸、適用海鱺養殖疾病預防體系之研發經驗

成功大學生物科技研究所之水產疾病及疾病預防研究團隊多年來對海鱺免疫系統之研究，成果簡略說明如下:
  海鱺之主要免疫器官與其他魚類似，為胸腺(thymus)、胰臟(spleen)及頭腎(head  kidney)；其免疫機制之完全發育可能在孵化十天左右就有免疫反應。這些資料 供應了我們發展海鱺疫苗抗原、劑型、佐劑、使用時間、使用策略之基礎。

  因魚對緊迫(Stress)非常敏感，Stress已証明會 降低魚之免疫力，免疫過程中應 避免過份操作以增加稚魚之免疫發生力。

 魚之免疫反應與營養，體質，種苗健康狀況，感染病歷及溫度等內外在條 件 皆有關，故免疫前稚魚之狀況，溫度等皆需充份了解再免疫才能達到最 佳 保護效果。

 海鱺專用的病原檢驗試劑之配合才能組合成海鱺之疾病預防及治療系統。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-12 23:53
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-12 23:57 編輯

三、海鱺用細菌性多價型疫苗研發

疫苗之開發，以取得當地目標魚種之疾病資訊及病原為首要，有了這些資訊才能發展疫苗及疫苗使用之方法及時程。以目前本土海鱺病原資料顯示尚未發現有病毒，而細菌則有弧菌(Vibrio  spp. Vibrio parahaemolyticus), 巴斯德桿菌(Photobacterium damsela subspecies picicida), 產氣單胞菌(Aeromonas hydrophila), 鏈球菌(Streptococcus iniae)為主。其發生期大多在緊迫大之移動(搬運、下箱網)，溫度變化，及在500克之前發生。因此海鱺之免疫策略應與石斑不同，而接近鮭魚。

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在海鱺疫苗研發以下列四點說明：

1. 抗原
  
  由澎湖、屏東之海鱺養殖場取得本土海域之細菌多株發展疫苗，并篩選最佳製法，  發展死菌疫苗疫苗。

2. 安全性實驗及有效性實驗

  研發成之疫苗於海鱺，注射十倍之劑量觀察其安全性，尤其確定無死亡率、解剖   觀察生理、腹腔無粘液殘存、外表無異狀，食慾、游泳正常。長期無成長率衰落之副作用。

3、實驗室人工攻毒試驗
   建立不同細菌於海鱺之攻毒系統，於實驗水槽以高劑量(LD99)之細菌，模擬在養   殖場高劑量菌感染之情形，進行免疫后之人工攻毒實驗，分析疫苗產品之有效性，有效期之長短及品管。并藉此系統發展海鱺之最佳免疫方法、時間。

(1). 海鱺血清力價試驗
發展海鱺血清ELISA檢驗試劑，以供海鱺抗病力之品質測定及免疫后抗病力之檢測。於實驗組及對照組，於免疫后不同時間各取用15隻海鱺進行 試驗，進行對於弧菌以及殺魚光桿菌之ELISA 力價測試。在疫苗注射之后疫苗組的血清力價有明顯上升的現線，而對照組則無顯示注射入體內的疫苗，的確能誘發魚體內產生抗菌的抗體。而對照組由於僅有注射佐劑，并無法誘發抗菌反應。

(2). 實驗組及對照組各使用15隻魚進行試驗, 然后觀察其存活率變化。   為期四週。結果顯示在攻擊后約一週，對照組開始出現死亡現象，而免疫實驗  組則應有80%以上保護力。

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4、海鱺養殖現場田間試驗

各實驗組及對照組各使用750隻海鱺魚進行試驗，每組并經由掃描標記，以使能於 同一箱網以同一養殖情況下進行現場有效性實驗。后計算成果。

實驗組注射疫苗，對照組僅注射佐劑。經由免疫及標示后養殖至200-250 克放入 同一箱網中進行養殖，一直到魚體重量達一公斤為止，期間約四個月。

在現場養殖的環境，對照組由250克到一公斤的存活率為44%，而疫苗組使用本  土型多價型疫苗存活率高達93.3%。并且只需免疫一次即可。顯示本土型多價型疫 苗在田間使用可以提供魚群良好的保護能力，以抵抗疾病的侵襲。
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作者: 水寶寶    時間: 2012-1-12 23:58
柒、海鱺用注射型疫苗選擇之注意事項

 目前水產養殖產業，尚未如畜禽產業擁有完整之疾病防治體系，及享有完備之疫苗與檢驗試劑產品之階段，且國內暖水魚種養殖戶對於疫苗產品的使用并不熟悉。加上國外鮭魚疫苗產業急著向國內推銷，以獲得他們的疫苗產品於暖水魚種使用之經驗，以及臺灣多個單位亦宣稱有適用於海鱺的疫苗。養殖戶面對新的科技產品，如何利用這些產品來提升利潤，面對多項產品要如何選擇？相信一定會有困擾。
以養殖業者之立場，選擇唯一之原則是使用優良的疫苗產品，以提高存活率，爭取最高利潤，使用的便利性，以及售后服務。

下述幾項選擇條件，供養殖戶參考使用：

一、有效性：

1. 是否使用本土病菌株發展之適用本土海鱺(有效)之疫苗。

2. 是否為死菌疫苗。活菌疫苗則絕對不能使用。

3. 是否為對抗大部份疾病之多價型疫苗？(因大部分養過程皆會遭受多種疾病之感染，對抗一種疾病之單價型疫苗并不能達到最高存活率)

4. 是否有配套檢驗試劑，可建立完整之疾病防治體系，以供魚苗之品質選擇，免疫后魚隻抗病力之測試，及養殖期間抗病免疫力之抽樣監控。
   二、使用方便性：

5. 是否需補強針，有些產品一次免疫就可有效用。
   三、安全性：

6. 是否在海鱺魚苗測試疫苗之安全性及有副作用：無死亡、腹腔生理，及養殖期間生長率之降低等。

7. 國際間以油質疫苗效果持久最佳，但腹腔免疫會短期降低食慾。

   四、售后服務：

6. 是否有具本土魚病經驗及執照之獸醫師售后服務團隊，協助養殖期間治療醫藥及現場之服務？

7. 是否有研究及快速檢測設施及專人、協助養殖期間治療醫藥及現場之病原及抗藥性檢測服務？
作者: kook    時間: 2012-1-13 09:17
給力，必須要支持�。�！
作者: 珠江所小廖    時間: 2012-1-13 10:24
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 08:38 編輯

漁用疫苗的使用，是預防魚病的最佳手段呀。石斑魚這兩年受病毒影響非常大，期待楊老師給我們指點迷津，請問國內和誰聯系，可以買得到這類疫苗並得到技術指導，謝謝！
作者: 浪漫小子    時間: 2012-1-13 10:30
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 08:37 編輯

請問：

是石斑魚注射疫苗對吧？

有石斑魚口服疫苗嗎？

南方都海南地區養殖石斑魚多？廣東有那些地方養殖？
作者: 零黎    時間: 2012-1-13 17:12
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 08:38 編輯

非常期待啊
還有石斑魚皮膚問題也很嚴重 希望能得些知識 如病原 如何處理等 謝謝
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:25
繼續與各位網友分享楊教授的幾篇論文。


發展生物科技協助石斑育苗產業之科技化

林翰佑、林青丘、陳逸民、陳宗岳、王涵青、楊惠郎

水產動物生技醫藥團隊，國立成功大學生物科技研究所



摘要:

在高科技產業的現代，研發創新科技、應用于創造知識經濟，乃是現代高科技產業發展之鑰。創新關鍵技術之掌握，也是爭取國際市場的方法。有鑒于地球上人口日增，而地球上有龐大近72%之面積是海洋，而可用于糧食生產之土地及淡水資源逐日減少之現實情況下，利用海水生產食品的產業必然是人類未來的民生產業。同時、臺灣有十分扎實的水產養殖基礎，但也面臨發展瓶頸。因此、成功大學組合水產養殖生技醫藥研究團隊匯集魚之流行病情、收集病原，以研發疫苗及疫苗在魚的使用法；分析魚苗發育條件，生產無病毒之健康魚苗；再整合魚苗之生產及疫苗之使用，生產魚養殖戶容易使用、且高抗病力(Pre-immunized Specific Pathogen Resistant，PI-SPR)魚苗。希藉此魚苗產品之推廣，減少疾病、提升存活率、以提高養殖業者利潤；降低抗生素濫用、減少藥物殘留、保障全民食品安全，并維護生產區之生態環境。此一長達八年之工作，始于組合研究團隊，選擇專一重點方向，集中資源，進行跨領域之研發。除研發創新科技及產品外，另組合系列產品成為產業能接受之生產系統；更導入企業管理模式，以試量產方式、建立量產標準作業手冊(SOP)。希望這些由學轉譯至產之先期準備工作，能增加技轉之成功率及加速產業化之效率。

團隊愿景希協助國內傳統水產養殖產業精致化，達到對地球友善、可永續經營之精致水產養殖產業的理想目標。更進一步作為水產養殖產業國際化之基礎。

  
二、產業發展關鍵困難：疾病是國際水產養殖產業發展之瓶頸

剖析產業發展現況，國內外暖水魚種之水產養殖產業目前皆尚停留傳統型高密度飼養方式。此種養殖方式因過度密集，導致疫病叢生，經營困難。導致之高死亡率也是國際高密度之養殖業在追求永續經營上最大之瓶頸。例如密集養殖造成疾病，1987年臺灣是年產量八萬噸的草蝦王國，但1990年開始草蝦養殖產業因白點病病毒性疾病而快速衰退，一蹶不振；石斑魚種苗因腦神經壞死病病毒感染育成成功率不到7%;臺灣為國際石斑魚魚苗供應中心，但受NNV感染成功率不到10%，2008 ISA (infectious salmon anemia)在智利發生大型感染，造成正急速成長之鮭魚養殖產業損失近20億美元。為解決疾病問題在未有疫苗以預防疾病之現況下，抗生素還是唯一的治療方法。而抗生素濫用早已造成養殖區抗藥性細菌之叢生，對環境造成破壞。例如本團隊在澎湖海面箱網養殖區取樣，發現對人類現用之14種抗生素皆已有抗藥性之細菌族群，并有些已高達60-80%，見圖2。

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作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:26
三、機會：水產養殖科技與企業化是掌握水產養殖發展的樞紐

冷水魚種之大西洋鮭魚（Atlantic salmon）養殖是目前全世界最成功的科技化與企業化水產養殖產業的范例。而挪威之鮭魚產業從無到掌握國際鮭魚市場，成功的因素包含研發鮭魚養殖科技、使用疫苗降低生產成本與抗生素殘留，筑造可永續并穩定生產之企業。在國際間、其鮭魚養殖科技及經營模式已使挪威成為全球領先的鮭魚研發及關鍵產品供應中心，延伸之經濟效益也促使挪威能在國際持續開拓市場，創造龐大的經濟產值。挪威科技化之鮭魚產業也成為國際各海洋國家皆希復制的范例。

暖水魚種遠比冷水魚種多，加上溫帶氣候佳，養殖期較長之產業優勢下，暖水魚種具比鮭魚更有市場規模及產品利基，應可比挪威之鮭魚養殖更具國際競爭潛力。但暖水魚種之養殖目前尚停留于傳統之經驗式、家庭式的小農產業，經營方式靠經驗，遇到瓶頸則不易解決。不能避免的、暖水魚種之養殖國際競爭下、未來必然將依循挪威之高科技、工業化之鮭魚養殖企業發展模式，發展其中、也急需發展創新科技、系統化以建立企業化之精致產業。
在世界對水產養殖產業需求穩定成長，而發展需要科技研發之現實情況下，臺灣投入此產業之優劣點分析如表1。以臺灣國際競爭力分析，臺灣水產養殖技術向以能養殖近120種魚、貝類，又曾以草蝦及養鰻王國著名國際，頗富產業基礎，并與日本，挪威同列世界三大水產養殖技術領先國家。例如臺灣石斑魚苗養殖技術領先國際，曾一度為世界唯一之石斑魚苗生產及供應國。石斑魚為生活于暖水區域珊瑚礁巖，近海肉食性魚種，由于其肉質細嫩鮮美，不但深受東方及華人喜愛，而且也被歐洲人列為佳肴，屬于高價位水產品。石斑魚在臺灣目前海水養殖之主要魚種，其年生產數量約在300萬公斤(據農委會及民間業者之資料，國內成魚養殖約五千多萬尾，魚苗產量超過七千萬尾)，因利潤高(平均20-70%)，除臺灣外東南亞、中國大陸等地也積極投入石斑魚成魚之養殖。最近魚苗需求量也因中國大陸之需求而大增，加上天然幼魚來源幾乎捕撈殆盡、且嚴重破壞其棲息區之珊瑚礁，未來以人工培育之魚苗市場發展頗富發展空間，成功大學在抗病力高的石斑種苗科技上之研究持續突破，保持國際領先地位。

以挪威以Bio-security建立鮭魚養殖質量鏈建立領導國際之經驗其方法之一就是先建立疾病防治的Bio-securit系統。以使用疫苗預防疾病，疾病少，存活率高、利潤提升就提升養殖戶接受新科技之興趣：減少抗生素用量就會減少藥物殘留降低提升魚貨質量，增加消費者購買之意愿；造成良性之經濟循環。更重要的是抗生素及化學藥物使用之減力更能維護養殖環境，對環境友善，筑構生產者、消費者及環境友善三嬴之永續經營產業生產目標。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:28
參、創新研發成果：

自2000年成功大學組合水產養殖生技醫藥研發團隊，稟承養殖產業管理預防重于治療的理念：如Bio-security養殖環境管理方式及以疫苗及免疫促進劑之使用，取代抗生素于魚病防治。團隊研究主軸為暖水魚種相關之生技醫藥的基礎及應用研究，并選擇高經濟價值的海水魚種，如石斑作為重點目標魚種，分析流行病情，進行生技醫藥產品與疾病防治方法的開發研究。目前研發成果如下:
一、選擇石斑作為重點魚種

1. 選擇石斑作為重點魚種

臺灣可完全養殖之魚貝類近120種，我們擇石斑(俗名Grouper、Garoupa、俗稱過魚、朱郭學名Epinephelus coioides, E. malabaricus, E. lanceratus)作為目標魚種,因其國際市場大、養殖技術有待突破、目前競爭少等利基優點。

在國際市場上、根據聯合國農糧組織(FAO)2004年的統計，石斑魚總產量為255,738公噸，總產值為511億元新臺幣，其中養殖者僅占24%。臺灣石斑魚總產量為13,219公噸，總產值為26.5億元。為世界第二大石斑魚養殖國。臺灣是國際石斑魚苗主要生產國，曾占有80%國際市場，約需魚苗7,000萬只，產值約為7億元。以全球需求量達14億尾，總市場產值更可達到140億元。因此石斑國內外皆有有極大之高質量健康魚苗之市場需求
2. 分析產業困難：石斑魚苗生產是石斑養殖發展的主要瓶頸

魚苗是水產養殖最重要之關鍵零組件，魚苗之量及質量攸關石斑產業之成敗。在魚苗之育成期主要之瓶頸有二：一是病毒感染，導致生產量之不穩定，二為質量不佳，常有畸型魚苗之發生。

石斑育苗期主要病情為腦神經壞死病viral nervous necrosis disease (VNN) ，而自魚苗后主要病原為NNV, irido病毒，細菌性疾病則為弧菌屬Vibrio spp., Vibrio parahaemolyticus, 發光桿菌Photobacterium damsela subspecies picicida, 單泡菌Aeromonas hydrophila及鏈球菌。Streptococcus iniae。
二、研發生技關鍵產品：

1. 檢驗試劑：在疾病防治之生技產品首要為精確(specificity)、靈敏(sensitivity)。除較熟悉的免疫檢測試劑外，分子檢測法如PCR方法因精確、靈敏漸受重視。我們也發展了臺灣常見之細菌(各種弧菌、單氣泡菌及發 光桿菌)、腦神經壞死病毒(Nervous necrosis virus，NNV)及虹彩病毒（Iridovirus)之PCR疾病檢測方法及套組。并廣泛使用于種魚、魚卵之檢疫。例如以NNV-PCR方法，發現石斑魚卵大都帶NNV病毒，同時坊間常用初期餌料之牡蠣卵、輪蟲及橈腳類皆帶NNV病毒為感染源。(圖3) 此real time PCR疾病檢測方法及套組為建立養殖區疾病及環境監控之bio-security system不可或缺的一環。

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作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:30
2. 疫苗與免疫促進劑

在預防重于治療的目標上，具預防疫病功能的疫苗更是bio-security的系統里最重要的關鍵零組件。疫苗之成效在哺乳動物如人類畜產及禽類使用不遑枚舉。但魚類之疫苗除在冷水魚種之鮭鱒鯛魚外，暖水魚種之疫苗、使用方法及成效則尚在萌芽階段。因臺灣海域暖水魚種如石斑在稚魚及育成期有顯著不同的流行病原，因而、我們發展了注射型疫苗供育成期使用及口服型疫苗供育苗期使用。

(1). 注射型不活化細菌疫苗

針對臺灣南部養殖海域五種重要病菌(Vibrio spp.,Vibrio parahaemolyticus, Photobacterium damsela subspecies picicida, Aeromonas hydrophila, Streptococcus iniae)發展了多價型不活化細菌疫苗，并經三年三個不同魚場，不同季節進行現場田間有效性實驗�？偣彩褂昧私�6000尾，其成果見表一。在暖水魚種免疫之成果供應了一些魚用疫苗使用的新經驗。例如

 發現多價型疫苗可以只經一次注射就預防五種重要病菌，

 不同魚種似乎有不同免疫反應時間

 本土菌株有較佳免疫力

 時間暖水魚種因溫度影響免疫反應有較快的免疫反應時間，免疫后約需400°C-days 海鱺就有免疫力 (鮭鱒魚約需1400°C-days )

 在臺灣及東南亞地區補強免疫(Booster immunization)反而降低保護力，補強免疫在暖水魚種似乎非必要

 先天免疫系統(Innate immunity)與 后天免疫系統都需同促進 以達到最佳抗病效果
   如表2所示，很顯然的是因疫苗可降低養殖期間不定期之死亡率，因此除減少魚苗需求量外也可降低飼料之費用，因此可穩定生產及經營利潤。

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作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:32
(2) 可在稚魚大量群體免疫之口服疫苗關鍵平臺技術

石斑育苗期之主要疾病為腦神經壞死病viral nervous necrosis disease (VNN)，病原為腦神經壞死病病毒nervous necrosis virus (NNV)。NNV感染石斑、鱸魚、比目魚、海鱺等重要經濟魚種自胚胎期之魚苗就會受感染，加上坊間魚苗缺乏疾病預防之觀念，當育苗失敗就將污染之池水不經處理，徑自排放，更加速病毒之傳播。VNN之病癥因病毒快速侵犯腦神經及視網膜細胞，而造成典型之旋轉式游泳近。NNV一旦感染很難幸免致死率達100%，被認為是為國際養殖高價魚種最棘手的病毒。更嚴重的是在胚胎期之魚苗就會受感染(在孵化14天就常發現病情)，在不同石斑中稚魚至成魚也有不同病毒發病期，如龍膽石斑在一年內尚常見感染，而青斑在三寸以上病惰明顯減少。而稚魚期一旦感染常達100%致死率，被認為是國際高價魚種養殖最嚴重的疾病之一。在研發NNV疫苗的過程中，最大困擾是NNV病情發生于稚魚不到0.5cm之階段，不能以注射或集中浸泡的方法免疫，故發展口服疫苗，而口服疫苗必需克服下列瓶頸：(a) 不吃或吃不夠；(b) 抗原被腸胃消化系統破壞；(c) 因魚苗尚在胚胎發育期，若疫苗成份不佳，會造成畸型魚苗。

本實驗室開發藉稚魚之天然食物鏈，以大魚吃小魚、小魚吃蝦米(豐年蝦)、蝦米吃單細胞生物(細菌)的自然現象，直接以表現NNV抗原蛋白的不活化(killed)大腸菌喂食豐年蝦，包埋含NNV抗原蛋白之大腸菌，再喂食稚魚。此疫苗不但連續二次以LD60之之攻毒實驗中，各達80% 及 86%存活率，而無免疫之魚存活率分別為 44% 及 54%，相對保護率(RPS; relative protection frequency) 達到 64.2% 及69.5%。且在現場田間實作上也成功使用，自2005年至今于本校安南育苗場田間測試實作，連續成功次數達24 次以上，皆可防止病毒感染，成功率達100%，相較目前坊間育苗場成功率不到1%高出甚多。

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此口服疫苗在NNV-Free之石斑魚苗繁養殖場田間實作測試也達到預防是效果，自Nov 2005已使用于成功大學安南育苗場連續成功 20 次以上，且無病毒感染成功率達100%而目前坊間育苗場成功率不到1%。因疫苗需一段時間才能充份發揮免疫保護力，但也發現在一NNV污染場單獨使用疫苗，并不能達到無感染之效果。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:33
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-14 09:35 編輯

(3). 口服疫苗關鍵平臺技術之優點

此服疫苗關鍵平臺技術結合基因工程及利用初期餌料包埋抗原之多元性，兼具下列優點：

2 利用基因工程只要該抗原基因已知，就可研發subunit vaccine,可利用于任何病原菌(如細菌、病毒、寄生蟲等)

3 提供抗原雙層保護(大腸桿菌與浮游生物)，減少腸胃道破壞

4 可發展為多價型疫苗。

5 可加入具免疫促進子(immune or/and immuno-modulator)的基因可加入本系統中，以促進魚的免疫反應

6 可利用此蛋白傳遞方法，發展其他功能蛋白

7 無需添加任何非生物性物質(如liposome, adjuvant) 無殘留、無副作用

8 安全性高，魚苗在無壓力下使用。

9 研發，制造及品管容易。

10 可迅速、同時免疫同池中之所有魚只。

(4). 可重復成功的石斑室內式育苗系統

水生之魚與陸地哺乳動物之?同，魚之成長由孵化卵至稚魚，這些胚胎發育皆在水中并無母體之支持及保護，完全依靠水環境供應其營養需求，育苗最困難:魚苗質量是養殖成敗之關鍵條件育苗就是在自然的水中將一受精卵(一細胞)培養成一只稚魚。加上水環境中充滿了病原菌(10-103/ml)，稚魚在生長環境中也長期面對疾病感染之危機。目前石斑育苗大都尚使用室外土池或水泥池育苗方式，利用造水繁養水中之藻相及浮游生物再于育苗不同階段，輔助外購之牡蠣受精卵、輪蟲及橈腳類生物。此種育苗方式靠自然形成之食物鏈，人工少、成本低，但在病毒感染已是常態下、成功率低，供應量不穩定，加上浮游生物質量很難掌握之情況下，質量參差不齊。目前尚是”靠天吃飯”的不穩定生產模式。在魚苗量及質量攸關水產養殖成敗之情況下，魚苗生產技術急需建立。

營養:初期餌料之質及量
  
關鍵條件
1 疾病
2 初期餌料之量與質
3 育苗之物理及生態條件

苗的關鍵條件:研究的方向

病：病情、病毒、病菌

在發現臺灣到處都有病毒之情況下利用室內無病毒SPF石斑魚養殖系統，生產高抗病力健康魚苗，成功提升養殖存活率。

O2, CO2, ammonium, nitrate, pH, bacterium, photo period, light intensity etc.,
Condition of Larvae rearing   


伍、推廣策略高抗病力之 (PI-SPR)魚苗生產系統

PI-SPR魚苗之優點
1 養殖戶使用方便,容易銷售,易建立品牌形象
2 產品可提高飼養存活率，降低成本，增加利潤
3 減少抗生素使用, 不易被模仿及競爭取代


作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:44

發展石斑健康魚苗科技 協助產業永續經營

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楊惠郎


國立成功大學農業生物科技中心



摘要

地球上人口日增，而地球上有龐大近72%之面積是海洋，在可用于糧食生產之土地及淡水資源逐日減少之現實情況下，利用海水生產食品的產業必然是人類未來的民生產業。同時、臺灣有十分扎實的水產養殖基礎，但也面臨疾病叢生之發展瓶頸。因此、成功大學組合水產養殖生技醫藥研究團隊，集中全力以石斑為主要目標，匯集流行病情、收集病原，研發多價型注射疫苗及疫苗在魚的使用法，以供成魚養殖階段的疾病控制及提升存活率；發明NNV病毒口服疫苗，解決了魚苗育成階段嚴重死亡的關鍵瓶頸，穩定青斑魚苗之育成。繼之、在魚苗穩定供應之情況下，分析并適化青斑魚苗育苗條件，提高魚苗生產效率；再整合魚苗之生產及疫苗之使用，生產魚養殖戶容決易使用、具高抗病力(Pre-immunized Specific Pathogen Resistant，PI-SPR)魚苗。希藉PI-SPR魚苗產品之新推廣策略下，供應養殖戶直接使用，藉此迅速減少疾病、提升存活率、提高養殖業者利潤；降低抗生素濫用、減少藥物殘留、保障全民食品安全；并維護生產區之生態環境。
此一長達十年之工作，始于選擇專一重點方向，組合研究團隊，集中資源，進行跨領域之研發。在傳統水產養殖蛻變成科技化的精致農業的目標下，研發創新科技及產品。最關鍵乃是水產養殖科技化生產系統之整合。在建立”一條龍”的安全高質量的生產鏈(High quality production chain)的觀念下，研發關鍵零組件，組合系列產品及多項技術成果成為知識經濟(Technlopgy based economy)。計劃執行以完全解決傳統水產養殖產業之發展困難為目的，產品設計則以市場接受度為原則，更導入企業管理模式，以試量產方式、建立量產標準作業手冊(SOP)。這些以市場需求導向(Market driven and mission oriented planning)來規劃的計劃，加速了由”學”轉譯至”產”之技轉之成功率及產業化之效率。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:48
一、 前言

1. 臺灣一向足以為傲、領先國際的水產養殖產業，一再發生疫病，產業面臨衰萎危機

臺灣及亞洲的水產養殖尚停留于傳統家庭式(backyard) 小農模式，素喜密集養殖，水中魚多、排泄物多、細菌就多，魚只受到緊迫(stress)，抗病力降低，造成嚴重病情及高死亡率。

疾病在臺灣已使多種重大水產養殖主要品種逐項淪陷。例如

 1987年，臺灣號稱草蝦王國年產量高達80,000噸，短短不到三年、自1990年開始草蝦感染白點病病毒(WSSV)而養殖失敗，產業一去不復返。

 同樣的白點病病毒病情在國際間也一再發生。例如白點病病毒在亞洲于1992年造成近美元4-6 billion之損失，不久在1999年白點病病毒猖獗中南美洲、也造成近1 billion美元送損失。

 養殖戶于是開始改養具白點病病毒高抗病力的新蝦種-白蝦，同樣地白蝦的桃拉(Taura)病毒，也很快地在1991-19921出現，造成近2 billion美元的損失。現在WSSV及Taura病毒是國際養蝦產業天天得面對的惡夢。

 在1990年代，一些臺灣養蝦戶也開始養貝類九孔或魚類石斑及海鱺。九孔近年來也深受不明病原侵犯，產業在臺灣已消失。

 改養魚類之養殖方向、備受看好的石斑，臺灣曾是為國際石斑魚苗供應中心，曾占有國際80%的石斑魚苗市場。近年來也受腦神經壞死病病毒(NNV, Nervous Necrosis Virus)感染，大部份石斑種魚及受精卵都帶病源，導致魚苗育成的成功再現率不到10%；

 在成魚育成上、海鱺及石斑由魚苗成魚育成率只約為20-40%。當然疾病問題也是國際水產養殖之共同問題，例如在2008年智利鮭魚養殖發生大規模ISA (infectious salmon anemia) 感染，造成正急速成長之鮭魚養殖產業損失近20億美元。

不同魚、蝦、貝類養殖產業同樣地受一直不停地受病害感染，養殖戶不停研發改養新品種，也一再失敗、重蹈覆轍。在養殖模式若不改進的情況，各種水產之養殖產業一蹶不振的歷史必將一再重演，這些疾病造成的產業困境，已使養殖業者一籌莫展。

密集養殖不只造成疾病，使養殖戶飽受損失；而為治療疾病、必需大量使用抗生素，導致魚貨的藥物殘留，消費者對魚貨質量的要求日嚴，藥物殘留使消費者怯步不前；養殖環境中抗藥性細菌之發生，抗生素逐漸失效，因而不得不加重劑量，再造成抗生素藥物濫用，抗藥性細菌之積存，更延伸造成養殖環境之破壞及產業衰微等后果。這由密集養殖到疾病，導致環境惡化及魚貨質量下降，環環相扣的因果循環，也就是傳統式養殖產業發展的瓶頸。

水產養殖產業發展歷史就有如陳李農改研究團隊執行長杜宇及海洋大學水產養殖系教授郭金泉敘述「臺灣水產養殖發展，始終落入不斷追求明星物種的迷思」，把「落跑當轉進」，遇到問題不澈底解決，而改養新魚種，是現在養殖漁業政策最大盲點。在疾病無國際的現況下，目前傳統水產養殖產業之發展困境已是臺灣也是國際水產養殖產業急待解決之瓶頸。

回顧人類及動物之醫學史，在疾病之控制、預防重于治療，在醫藥之使用的成功經驗上、預防疫苗功能更勝于治療抗生素之使用。在水產動物之疾病控制上、當前歐美水產養殖產業之冷水魚種鮭魚養殖已全面成功地使用疫苗提升飼養成功率。臺灣及其他開發中國家現有的家庭式(backyard)經營的暖水魚種之養殖則尚未使用疫苗來解決疾病傳染。海水水產養殖已被國際重視，工業化之水產養殖也是國際各海洋國家積極建立水產養殖產業的理想目標。
2、石斑養殖業面臨疾病危機，石斑王國前途堪憂

石斑(俗稱朱過魚、郭魚)魚肉質鮮美，是華人最喜歡的高價桌魚。石斑魚棲息于珊瑚礁的底棲魚類，不易以魚網捕捉，通常需以釣竿、魚槍、炸藥或毒藥麻醉捕取。這種捕魚法也造成珊瑚礁生態的破壞。過度捕撈也使多種石斑瀕臨絕種，如赤點石斑魚，鞍帶石斑魚(龍膽石斑)皆已分列為”頻危”或”易�！逼贩N。亡羊補牢應以養殖取代捕撈。最近石斑也在ECFA上被列入早收清單，市場極富潛力，養殖戶頗為興奮。因此在經濟上、食用上、生態維護上，石斑為一臺灣值得投入養殖的魚種。

石斑魚苗繁養殖最主要的病原為NNV病毒，成魚育成階段則為細菌性疾病為主。NNV是一種非常簡單的RNA病毒，只感染魚類，尤其在魚苗階段最為嚴重。NNV也感染鱸魚、比目魚、海鱺等重要魚種，更嚴重的是臺灣最普偏的青斑及龍膽石斑在胚胎期之魚苗就會受感染，在孵化后14至50天最常見疾病發生，在龍膽石斑50天后之稚魚至成魚階段則也見病毒感染。而稚魚期一旦感染常達100%致死率，被認為是國際高價魚種養殖最嚴重的疾病之一。因為一般石斑養殖戶缺乏疾病控制的觀念，一有病毒感染、育苗失敗，就直接排放未經處理的養殖用水，因此也將大量的病毒傳播，感染更多魚只并污染環境。我們多年來以最敏感之檢測方法(RT-PCR)調查臺灣石斑生產區NNV病毒流行狀況，發現南部石斑養殖之環境已完全被病毒污染，因此、在臺灣石斑養殖區可說已是偏地病毒，傳統Mesocosm方式生產石斑魚苗之過程中有多重不同途徑病毒可趁隙而入。例如檢測之近百尾種魚中帶病原，生產之受精卵近90%也發現帶病毒，可由垂直方式感染魚苗；更嚴重的是石斑魚苗必需之初期餌料-坊間之橈腳類浮游生物也可能因養殖土池之污染大多也帶病毒，在育苗的不同階段感染魚苗。而坊間之一般魚苗場尚無嚴格的安全隔離觀念(Bio-security)及設施，也會因育苗池內部及工作人員及訪客外人攜入；在眾毒”圍城”之下當然無一幸免、一一淪陷。

作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:49
二、 成功大學組合研究團隊投入石斑生物科技之研究

在高科技的現代，危機就是轉機，轉機創造商機�，F代養殖生產戶必需同時維護生產環境及保持產品質量。因此民生養殖產業已逐漸走向資及量必需兼顧的綠色生產模式。綠色有機養殖業，需利用科技，預防疾病，精致管理，建立生產履歷，發展對環境友善，生產優質產品，負責的生產方式。才能建立可永續經營的養殖科技。

成功大學地處臺灣南部石斑養殖區，為協助產業，我自2001年由中央研究院轉任國立成功大學，就組合水產生技醫藥研發團隊。團隊迄今已有5位助理教授以上研究人員，加上研究助理及研究生共約四十多位研發人員，為一具國際規模之水產養殖生技研究團隊。研究專長涵蓋魚病，疫苗研發及測試，魚免疫學，魚與病毒交互機制，胚胎發育之營養需求及藻源醫藥成份，蝦免疫學，養殖緊迫分子機制。實驗設施在校方支持下，在成功校區已有近200坪之分子生物、病理、微生物、免疫、病毒之實驗室，在安南校區現有100L及500L細菌酦酵糟供疫苗及免疫促進劑之生產，并建構近250坪之水產實驗設施，供疫苗測試使用。其中最特殊的是一國際首座的室內式無病毒(SPF)石斑魚苗孵化育成場，及室內式無病毒(SPF)初期餌料生產設施，已可長期穩定地生產無病毒石斑魚苗供實驗用。團隊的愿景以研發生物科技協助石斑養殖產業科技化(精致農業) ，由關鍵產品之研發，到系統整合。在生產質量鏈(Quality chain)的工業化養殖的觀念下，發展能澈底解決傳統式水產養殖產業危機，建立成科技化養殖產業的創新科技，并選擇石斑為目標產業。

團隊研究主軸為暖水魚種相關之生技醫藥的基礎及應用研究。并選擇高經濟價值的海水魚種，如海鱺與石斑作為目標，以研發魚用疫苗科技、檢驗方法及疫苗產品，分析魚苗育成條件，建立安全無病毒之魚苗生產方法。解決產業發展瓶頸，帶動國內水產養殖產業之科技化及產業升級，并以建立成國際領先之石斑養殖研究及人才訓練中心作為愿景。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:51
三、 創新科技研發成果：石斑魚疾病及預防生技醫藥的科技研究成果

魚類與一般我們熟悉的哺乳動物不同，就是其受精卵到魚苗(胚胎)是在水中(體外)發育，因此魚的胚胎的營養需求就得由水環境中攝取，同樣地、在處于水中的魚苗在發育階段就會受到外來病毒或病菌的感染。而在石斑的養殖上，最大的關鍵瓶頸是在其胚胎發育的營養供應及疾病防治。

目前現行的育苗方法分為全室外式(mesocosms)及半室內式育苗場。二者主要差別在魚苗育成，前者魚苗及初期餌料皆在同一室外池，后者則是將魚苗育成移至室內以避免天候條件影響魚苗之發育，但初期餌料培養尚在室外。分析石斑魚苗育成之失敗原因，石斑魚苗之關鍵條件有下列三項要件:

 需控制病毒感染，方能穩定生產

 得分析育苗條件，才能提升生產效率

 調配初期餌料營養成份，解決畸型率，生產高質量魚苗

我們由此方向，按序研發，逐一解決困難。成果略述如下：
成果1、疾病控制：可在稚魚大量群體(massive)同時免疫之口服疫苗技術

雖然注射型疫苗已在人類及陸地養殖動物中大量使用，也成功地控制疾病，但在魚類中只有冷水魚種之鮭、鱒類使用之疫苗，而眾多之暖水魚種尚無疫苗可用。因此我們實驗室投入暖水魚種之疫苗研發。

在研發NNV疫苗的過程中，因NNV病情發生于稚魚不到0.5cm之階段，不能以注射或集中浸泡的方法免疫，故發展口服疫苗，而口服疫苗必需克服下列瓶頸：(a) 不吃或吃不夠；(b) 抗原被腸胃消化系統破壞；(c) 因魚苗尚在胚胎發育期，若疫苗成份不佳，會造成畸型魚苗。

實驗室開發藉稚魚之天然食物鏈，以大魚吃小魚、小魚吃蝦米(豐年蝦)、蝦米吃單細胞生物(細菌)的自然食物鏈，直接以不活化(inactivated)含NNV抗原蛋白的大腸菌喂食豐年蝦，包埋含NNV抗原作為疫苗，再以此豐年蝦喂食稚魚。此疫苗不但在實驗證明可有效地預防病毒感染，而且在現場田間實作上也連續成功次數達40 次以上，皆可防止病毒感染，成功率達100%，相較目前坊間育苗場成功率不到10%高出甚多。

此魚用疫苗關鍵平臺技術(universal platform technology)有如下特色及優點：

結合基因工程可選殖及表現任何病毒或病菌之抗原基因，可開發多種口服疫苗。

以單細胞生物(如大腸菌)內大量表現抗原蛋白，增加疫苗之單位劑量(大腸菌達1000倍) 。

提供雙層生物包埋層(bio-layer，大腸桿菌與浮游生物)保護抗原，可減少魚腸胃消化酵素之破壞。

可發展為多價型疫苗。

利用浮游生物自動濾食單細胞生物之現象，疫苗制造容易，品資均一，品管簡單。

因疫苗包理于稚魚之食物中，一旦投喂可迅速并同時免疫整池全部稚魚，減少每尾注射之人工、時間及對稚魚造成之緊迫。

因輪蟲及豐年蝦多數魚類之稚魚皆會攝食，因而此口服疫苗可使用于大部份之魚類。

可在稚魚階段使用，提早免疫。

迅速、同時免疫同池中之所有魚只。

疫苗成份全為可消化成食物之成份，安全、無殘留、無副作用。

此口服疫苗技術成功，不但解決了國際石斑育苗病毒感染的產業問題，而且是國際首次證明可在稚魚階段魚用免疫關鍵方法的創新發明。
成果2、疾病控制：育成期使用之系列疫苗

我們也匯集臺灣養殖區域常見之多種細菌病原，研發多價注射型疫苗，并證明只需注射一次即可在一年的育成期達到預防疾病之效果。
成果3、環境：以隔離式的生物安全(Bio-security)原則、構建亞洲首座無病毒之石斑魚苗生產系統

我們發現口服疫苗并不能在坊間現有育苗場完全阻隔病毒之感染。其原因是在孵化至二寸苗近六十天的育苗期病毒能自多種途徑感染病毒。因此一無病毒之室內養殖場及無病毒初期餌料之生產也是為石斑育苗之必要條件。我們由了解目前坊間之土池及半室內式魚苗場失敗之經驗，分析病毒之感染途徑在環境中，自行設計一座完全隔離式的石斑育苗場。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:55
成果4、魚苗發育：分析育苗條件，提升生產效率

在此干凈、無病毒(NNV-SPF)的硬體設施下，供應我們研究實驗環境。在耗費近六年時間分析石斑魚苗發育之物理、化學及營養之各項條件，發展了一可隔離外界病毒污染的生產標準流程(SOP)。在硬、軟體配合下，加上完善嚴格的管理，四年來已近四十次連續成功生產每批可達萬尾級的先導生產規模(pilot scale)。充份地證明在已有病毒的環境中、若使用此新型完全室內式的石斑魚苗生產系統，可以成功地生產健康的石斑魚苗。

成大室內式的石斑育苗生產系統已可完全避免病毒感染，100%的成功再現率，穩定單位生產量，生產高抗病力之石斑魚苗。達到工業化之”計劃生產”方式。其成效見表一。
水產前沿網

成果5、營養：調整初期餌料配方、降低魚苗畸型率

畸型魚苗常是魚苗生產上常見的缺陷。我們分析現用初期餌料之成份及魚苗發育各階段的營養需求，發展不同初期餌料之營養配方，已可將青斑魚苗畸型率降低(表二)。大量提升魚苗之良率。
水產前沿網

成果6、 魚類疫苗推廣策略：高抗病力之 (PI-SPR)魚苗
在能成功養殖石斑魚苗后，為事先預防田間一般成魚育成期將遭遇的細菌性疾病，并同時顧慮到養殖戶對疫苗使用的陌生，必導致疫苗推廣困難。因此、設計一推廣策略，亦即將在魚苗在交付養殖戶前，預先注射在養殖過程可能遭遇的多種細菌的疫苗。此預先已防疫的石斑魚苗(Pre-Immunized Special Pathogen Resistant, PI-SPR)魚苗，將具高抗病力，因而育成養殖期必有較高存活率。此PI-SPR魚苗也因此具養殖戶使用方便；產品可減少疾病、提高飼養存活率；降低成本、增加養殖利潤；魚苗具品牌形象，不易被模仿及競爭取代及可減少抗生素使用，維護養殖環境等優點。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-14 09:56
四.系統整合

團隊組合當初、我們依循人類或陸地畜、禽產生技醫藥研發的模式，很單純地只往個別疫苗及單一技術進行研發。但努力四年使用于實驗室證明有效的口服疫苗，于現有坊間半室內式育苗場卻一再失敗。依此經驗，我們發現在水生動物的疾病控制策略與陸地養殖生活于空氣中的動物決然不同。因此在研究及產品研發的觀念，研發方向及防疫策略皆由失敗經驗中學習，重新制訂。

以此新觀念、以近六年以生產bio-security的原則，整合環境、營養、防疫三個互動的情況，研發系列的解決方法、產品(關鍵零組件) ，并培育具新觀念的人才，再全盤整合，建立數據化的標準作業手冊(SOP)。再經三年、進入試量產之工作，進行萬尾級的試量產，產品田間試用驗證，證明此系統生產的PI-SPR魚確可協助養殖戶大量降低疾病、育成率高，提升經營利潤；大量減少抗生素使用、生產無藥物殘留之魚貨供消費者安心使用；也使水產養殖成為一對環境友善并可永續經營的精致產業。
五、總結

由團隊之組合，創新技術的研發，系列預防醫藥產品之開發，無病毒魚苗生產系統之構筑及新的PI-SPR高抗病力魚苗產品之推廣策略，一連串由學至產的系列的努力成果及策略規劃，我們希望成果能快速技轉產業，大量生產PI-SPR的高抗病力石斑魚苗，供應石斑養殖戶使用。供應消費者質量佳、無化學物及抗生素殘留的有機石斑。協助臺灣傳統石斑養殖產業之轉型，科技化、精致化。構建可永續經營的綠色石斑養殖產業，也希望藉此持續保持臺灣在國際暖水魚種養殖科技之領導地位。
作者: 等風    時間: 2012-1-15 15:30
支持！明天上午準時關注！
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-15 16:31
上次我們采訪楊老師的幾個問題，在此也與網友們一起分享下：


問：您是從什么時候開始做石斑魚疫苗的，這個疫苗針對的是什么病原，此病原的危害有多大？

楊.：我在疫苗研究是1995年由畜產疫苗開始,1999年才轉入水產疫苗。開始由育成期多種細菌性疾病開始，在2000年発現石斑魚苗(胚胎)期會罹犯旋轉病病毒(NNV) 非常特殊，在幼水魚苗如何使用疫苗對科學家也很具挑戰。

NNV(Nervous necrosis virus,腦神經壞死病病毒)感染石斑、鱸魚、比目魚、海鱺等重要魚種自胚胎期之魚苗就會受感染， 不同石斑有不同病毒發病時期，病癥: 旋轉式游泳 ，病理:腦細胞及視網膜細胞之感染 ，在石斑魚苗期感染具近100%致死率，漸漸被認為是為國際養殖高價魚種最棘手的病毒。

作者: 水寶寶    時間: 2012-1-15 16:33

問：目前主要應用于石斑魚的那個成長階段，免疫的效果如何？


楊：我們目前有二類疫苗系列產品可預防由魚苗至育成期常見之大部份疾病,達到全面預防之目標。(魚病多,若只針對一種疾病防疫也是徒勞無功。)

第一類系以魚苗期以NNV之口服疫苗為主效果可充份預防魚苗期病毒

第二類是注射性多價型疫苗,成果是達到一年存活率80-90%。結果皆已発表于國際學術期刊(可用google查閱”楊惠郎”或Huey Lang Yang)。并請參閱上述背景說明。

作者: 水寶寶    時間: 2012-1-15 16:34


問：該疫苗是否獲得商業上批準，正式生產應用在實際生產中？

楊： 應是，但法規上準許耗時，在申請執照中以自家疫苗之方式使用,但不準銷售。



問：在大陸，疫苗從研發到正式獲得批準進行商業生產并應用于實際生產需要很長甚至幾十年的情況，臺灣的情況如何？

楊：相同

作者: 水寶寶    時間: 2012-1-15 16:34

問：您從事科研工作以及從事疫苗研發，對于您的工作有何感受？


楊：很幸運地、各項研發成果逐漸獲得國、內外學產界之肯定。在國內曾獲得教育部產學合作獎、生策會國家新創獎(生物醫學,2007)、工業局生技創新發明應用競賽金牌獎(2008)及金、銅牌獎(2009)。在國際上、曾獲得惠普(HP: Hewlett Parker)年青學者發明獎，2009年歐洲水產學會最佳墻報獎及2009年”發展中國家科學院農業科學獎 (TWAS Prize in Agricultural Sciences)。除學術上成果也可貢獻產業，造福人類。


我們已技轉產業，正大量生產PI-SPR的高抗病力石斑魚苗，希望快速推廣此研發成果，

l供應石斑養殖戶使用，協助傳統石斑養殖產業之科技化、精致化，

l供應消費者質量佳、無化學物及抗生素殘留的有機石斑，

l在環境維護上，構建可永續經營的綠色石斑養殖產業。

作者: 水寶寶    時間: 2012-1-15 16:35

問：您對疫苗防病的前景怎么看，至少在現在大陸疫苗還不是主要的防病手段？


楊：預防重于治療。觀察人類許多重大疾病防治成功的先例，觀察人類許多重大疾病防治成功的先例，往往都是先以疫苗預防疾病，輔以檢驗試劑確定病原，再以對癥之醫藥(含抗生素)來治療疾病，這三大醫藥關鍵零組件之齊備，才能組合成為現代疾病防治之體系。在水產養殖之過程中，必需有適當的魚用疫苗可用來生產高抗病力之魚苗，以事先預防未可預測及突發的疾��；不同之檢驗試劑在病情初發期可快速確定病原及相關抗藥性，以對癥下藥并可檢測疫苗免疫之效用，抗病力之監控及作為魚苗質量之檢定；而醫藥可只使用于病原已確定、抗藥性已偵測過之細菌，作有效，正確的治療。此疾病防治系統已在人類使用多年、效果也證明良好。在畜產業上之使用也逐漸取代以抗生素預防疾病之劣習。魚產業中、挪威及歐美也沿用多年證明正確有效。但目前暖水魚種養殖上，疫苗及檢驗試劑之一并研發極為迫切，也只有這二件關鍵零組件之建立，方能配合醫藥來組合暖水魚種的疾病防治之體系。


我們已經知道疫苗早已是人類，畜產不可或缺的預防醫藥。豬，牛，羊，雞，鴨等畜禽產及寵物用疫苗也是疫苗產業之重點。但是暖水魚魚病相當嚴重，卻尚無疫苗、檢驗試劑之疾病管理系統。我們最近每每看到東南亞的水產品因含氯霉素在歐、美、日本退貨的消息，是否歐美日故意使用高檢驗標準來排斥外貨？還是我們也應開始思考養殖是否可以不用抗生素？都是先以疫苗預防疾病，輔以檢驗試劑確定病原，再以對癥之醫藥(含抗生素)來治療疾病，這三大醫藥關鍵零組件之齊備，才能組合成為現代疾病防治之體系。在水產養殖之過程中，必需有適當的魚用疫苗可用來生產高抗病力之魚苗，以事先預防未可預測及突發的疾病；不同之檢驗試劑在病情初發期可快速確定病原及相關抗藥性，以對癥下藥并可檢測疫苗免疫之效用，抗病力之監控及作為魚苗質量之檢定；而醫藥可只使用于病原已確定、抗藥性已偵測過之細菌，作有效，正確的治療。此疾病防治系統已在人類使用多年、效果也證明良好。在畜產業上之使用也逐漸取代以抗生素預防疾病之劣習。魚產業中、挪威及歐美也沿用多年證明正確有效。但目前暖水魚種養殖上，疫苗及檢驗試劑之一并研發極為迫切，也只有這二件關鍵零組件之建立，方能配合醫藥來組合暖水魚種的疾病防治之體系。

作者: 水中樂    時間: 2012-1-15 23:56
這次來了中國大陸之外的專家座談了。等候……
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 08:36
各位童鞋早上好！是否已經等待很久了呢？

今天我們在線交流將于9點半正式開始，時間只有2小時，邀請的嘉賓是臺灣國立成功大學楊惠郎教授，正如樓上所說，是第一位大陸之外的專家哦！��！

楊教授對石斑魚疫苗有多年的研究，感興趣的童鞋抓緊時間提問哦！
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 08:40
由于楊老師比較習慣看繁體中文，所以，請所有提問的童鞋盡量用繁體中文哦！

如果你沒有也沒關系，小編我來幫你轉
作者: 水中樂    時間: 2012-1-16 09:22
各位童鞋早上好！是否已經等待很久了呢？

今天我們在線交流將于9點半正式開始，時間只有2小時，邀請的嘉 ...
水寶寶 發表于 2012-1-16 08:36


作者: xiaofei27    時間: 2012-1-16 09:23
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:29 編輯

難得有機會與楊老師交流，很榮幸能提幾個問題：
'.病毒具有很強的宿主特異性，這種特異性在不同魚種的差異大嗎？打個比方，nnv在石斑魚中是重要的病原，在對于其他魚種也會致病嗎？
;.在大陸，魚用疫苗得到了廣泛的認可，但是使用並不廣泛，這種情況的原因是什麼呢？在臺灣是否也有這樣的情況？
.NNV在臺灣的流行情況如何？
謝謝您的答複。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 09:31
xiaofei27動作很快哦！感謝參與！
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 09:34
楊老師，上線了先別著急回答問題，先和網友們打個招呼吧！
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 09:39
回復 36# xiaofei27


    NNV的感染機制但也尚在努力中.

疫苗在臺灣目前尚未有官方通過獲得執照的產品,並無實際使用,但需求存在,問題在行政單位核審嚴,注射不方便,價格高,
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 09:41
各位好,謝謝參與,敬祝新年快樂
作者: lin9902057    時間: 2012-1-16 09:41
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:44 編輯

楊老師，您的口服疫苗免疫率有多少？
作者: fishdis    時間: 2012-1-16 09:42
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:44 編輯

請問楊老師，NNV疫苗是核酸疫苗？還是減毒或滅活疫苗？
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 09:44
NNV也感染鱸魚、比目魚、海鱺等重要魚種，更嚴重的是臺灣最普偏的青斑及龍膽石斑在胚胎期之魚苗就會受感染，在孵化後14至50天最常見疾病發生，在龍膽石斑50天後之稚魚至成魚階段則也見病毒感染。而稚魚期一旦感染常達100%致死率，被認為是國際高價魚種養殖最嚴重的疾病之一。
作者: fishdis    時間: 2012-1-16 09:44
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:45 編輯

中國水産科學研究院珠江水産研究所自主研發的草魚出血病活疫苗（GCHV—;892株）獲得國家生産批準文號（獸藥生字（獸藥生字（2011）190986021），），這是我國曆史上首個水産疫苗生産批文。
作者: 老兵新傳    時間: 2012-1-16 09:47
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:49 編輯

楊教授，請問您的疫苗是抗體疫苗（被動免疫）還是抗原疫苗（主動免疫）？免疫後到産生保護作用，大約需多長時間？
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 09:50
回復 41# lin9902057


    在實驗室攻毒試驗達到"比較存活率RPS"
攻毒實驗        免疫組(%)        控制組(%)        相對保護率(%)
A次        80 (20/25)        44 (11/25)        64.2
B次        86 (30/35)        54 (27/50)        69.5

育苗場現場使用因常有NNV侵入,而疫苗需七天才能発生效果所以效果不佳.我們也已有的解決方法請參考po上的"發展生物科技協助石斑育苗產業之科技化"文章
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 09:51
各位網友提問好積極，小編也有一些疑問想請教楊老師：
2011年4 月，新聞報道臺灣成功大學與慕洋生技簽署優質石斑魚苗養殖系統技術轉移授權書，楊老師能否介紹一下“優質石斑魚苗養殖系統”？
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 09:52
回復 45# 老兵新傳


    是被動免疫,目前臺灣也有passive immunity的iRNA, 及IgY的產品研發中
作者: 南海漁醫    時間: 2012-1-16 09:53
請問楊博士兩個問題：一 NNV垂直傳播，病毒粒子是在附著卵表面還是在坯胎內部？有研究顯示用碘消毒可消滅病毒粒子，但臺灣島內研究病毒粒子位于坯胎內。如果是在卵膜表面，做好消毒就可以，但如果是坯胎內部，破膜的幼體已經帶有病毒，再投喂疫苗有無效果？
二 個人研究顯示大陸南方海南的石斑魚幼魚NNV帶毒率接近100%（PT-PCR），但帶毒不一定發病,就是半斤的石斑魚帶毒率也在97%以上，大概2年前左右，石斑魚30天內苗黑身打轉癥狀極為明顯，而現在黑身多，但很少打轉，檢測也是NNV，是不是病毒出現變異？篩選抗NNV的石斑魚品系有無可能？
祝好！
作者: fishdis    時間: 2012-1-16 09:53
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:56 編輯

前面介紹了那麼多內容，我看幾乎全部是做宣傳的，而很少涉及疫苗本身的。
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 09:56
回復 47# 水寶寶


    就是已po上之SPR魚苗,方法是魚苗出貨前先注射免疫育成階段會預見的病原,二年來在田間現場成果提升育成存活率由原來之30%至80%
作者: xiaofei27    時間: 2012-1-16 09:57
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 09:59 編輯

回復 43# 楊惠郎


謝謝楊老師，如果這樣說的話，nnv的宿主範圍還是很廣的，疫苗的應用範圍也更大。是不是可以這樣認爲：病毒在魚類中的種間特異性並不明顯？或者只是nnv的宿主範圍比較廣？
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 09:58
回復 50# fishdis


    李老師您可以多問問您感興趣的問題落！
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 09:58
回復 42# fishdis


    口服是滅毒疫苗,注射是次單元疾苗Subunit vaccine,
作者: blackcarp    時間: 2012-1-16 10:00
請問楊博士兩個問題：一 NNV垂直傳播，病毒粒子是在附著卵表面還是在坯胎內部？有研究顯示用碘消毒可消滅病 ...
南海漁醫 發表于 2012-1-16 09:53



   也想問這個
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 10:01
回復 51# 楊惠郎


    那可隔離外界病毒汙染的生産標準流程(SOP)能與大家分享一下嗎？
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:04
回復 50# fishdis


    是的,在學校石斑魚苗產量小(每批大約五萬尾),二年來田間實作達80%存活率,,不足作大規模實驗以累積實作成果,我們正要求技轉承接廠商努力生產SPR高抗病力魚苗以供田間實作
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:05
回復 56# 水寶寶


   非常精確的問題, 現已技轉廠商,恐需他們同意
作者: fishdis    時間: 2012-1-16 10:06
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:09 編輯

謝謝楊老師！也就是說魚苗階段主要是采用滅活疫苗－最傳統的疫苗。注射用的亞單位疫苗適用于大規格魚。
作者: blackcarp    時間: 2012-1-16 10:07
楊教授您好！另外我想問下，目前蝦蟹上能否按您的苗種期免疫思路進行防治一些苗種期和養殖過程中的病毒��？
這種多重包裹，保護抗原的思路很好，我想在集約化養殖時候是容易做到的，一旦進入到養殖環節是否還能很好應用？養殖時魚苗散放於池塘中，天然餌料為主時該如何預防？
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:08
回復 55# blackcarp


    我們覺得應大部份在卵外殼,因可用方法去除,若在卵內恐用碘也不行了,也會影響孵化率
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 10:11
前天幾網友問的問題：
漁用疫苗的使用，是預防魚病的最佳手段呀。石斑魚這兩年受病毒影響非常大，期待楊老師給我們指點迷津，請問國內和誰聯系，可以買得到這類疫苗並得到技術指導，謝謝！

不知道這項技術是否能轉化到大陸來呢？
作者: blackcarp    時間: 2012-1-16 10:11
問題蠻多：關於口服疫苗的安全性，散失於水體中的，以及魚苗排泄出的疫苗成分，如一些毒力基因是否有可能被自然界的其他細菌或病毒所攝取並改造為自身的毒力成分？這些非病原可能成為其他養殖魚類的病原，目前有無安全對策。
作者: 浪漫小子    時間: 2012-1-16 10:11
哇，好熱鬧，暫時未想到有什么問題
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:12
回復 41# lin9902057


    我們的育苗系統(使用SPF硬體及疫苗)已達到五年近五十次連續無病毒五萬尾pilot生產,詳請見已po之文章
作者: 張永安    時間: 2012-1-16 10:14
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:15 編輯

請教楊老師兩個問題：
1、 滅活的NNV口服疫苗是如何制備的？是將滅活的NNV病毒直接添加在飼料中嗎？但是從您的文章中看到，您是將NNV的抗原表達在大腸桿菌中投餵豐年蝦然後作爲餌料來給石斑魚口服，這不應該成爲滅活疫苗吧！

2、請問注射用的NNV亞單位疫苗您是用的NNV的哪個蛋白所謂保護性抗原的？
謝謝！
作者: 南海漁醫    時間: 2012-1-16 10:16
本帖最后由 南海漁醫 于 2012-1-16 10:55 編輯

請問楊博士：臺灣石斑魚苗以池塘培育為主還是車間的水泥池為主？ 在大陸海南這兩種方式都有，但以池塘為主，直接放受精卵到池塘，如果這樣，楊博士您開發的這種疫苗可否應用？是不是池塘需要投喂大量帶抗原的大腸桿菌？第二個問題 石斑魚NNV有沒有研究母體免疫的可能，讓受精卵和坯胎直接帶有抗體。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 10:16
回復 66# 張永安


    哇，張老師來了，非常歡迎！
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:18
回復 63# blackcarp


    是的,我們也了解此問題,首先這些基因在二天內用rtPCR尚可檢測到,但以後就查測不出來,又也已不用抗藥性(antibiotic resisitant marker)作selection marker.所以已解決你關切的抗藥性殘留基因的困擾
作者: 老兵新傳    時間: 2012-1-16 10:18
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:22 編輯

聽說臺灣石斑魚虹彩病毒疫苗研發也取得很好進展，楊教授能否順帶簡單介紹一下？
作者: 浪漫小子    時間: 2012-1-16 10:22
楊教授，您好

1、疫苗對田間作業成活率的有大幅的提升，這是值得肯定的。

2、在臺灣，工業化養殖石斑魚，一般業界認為成活率是多少%，使用疫苗提升至多少%
作者: blackcarp    時間: 2012-1-16 10:22
虹彩病毒疫苗，國內好像鱖魚上有做滴？記不清楚了
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:25
回復 67# 南海漁醫


    臺灣石斑魚苗以池塘培育為主還是車間的水泥池為主？ 在大陸海南這兩種方式都有，但以池塘為主，直接放受精卵到池塘，如果這樣，楊博士您開發的這種疫苗可否應用？
A: 已有病毒感染之育苗場,疫苗使用效果不佳,因疫苗需七天後才有免疫力.

第二個問題 石斑魚NNV有沒有研究母體免疫的可能，讓受精卵和坯胎直接帶有抗體。
A. 是的,可行,但病毒感染途徑多,母體垂直感染只是其一,我們的經驗是需全面防止來自各方的病毒,因此花了近八年発展全面防止無病毒之石斑育苗系統,詳請參po文
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 10:25
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:28 編輯

回復 72# blackcarp


    曾令兵研究員做了娃娃魚虹彩病毒的疫苗
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:30
回復 71# 浪漫小子


    在臺灣，工業化養殖石斑魚，一般業界認為成活率是多少%，使用疫苗提升至多少%
A: 坊間之傳統育苗大約十次有一二次會成果,我們的系統是連續成功無病毒育苗近五十次,並已技轉給廠商以迅速量產供業界使用
作者: fishdis    時間: 2012-1-16 10:31
本帖最后由 fishdis 于 2012-1-16 10:33 編輯

回復 74# 水寶寶
是的，曾令兵研制的大鯢虹彩病毒疫苗也是滅活疫苗，在試用中，效果不錯。我國有批文的只有一個草魚呼腸孤病毒疫苗。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 10:32
楊老師，請問您研發的口服疫苗大約還需多久的時間能通過政府部分的審批呢？
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:33
回復 70# 老兵新傳


    彩虹有三、四種.在魚苗階段沒NNV嚴重,大多発現於育成期我們也研発次單位疫苗
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:33
回復 77# 水寶寶


    真的不曉得
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 10:35
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:40 編輯

楊老師，接下來您在石斑魚疫苗上還會開展哪些方面的研究？
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:38
回復 66# 張永安


    Q. 滅活的NNV口服疫苗是如何制備的？是將滅活的NNV病毒直接添加在飼料中嗎？但是從您的文章中看到，您是將NNV的抗原表達在大腸桿菌中投餵豐年蝦然後作爲餌料來給石斑魚口服，這不應該成爲滅活疫苗吧！
A. 我們係將抗原表達在大腸桿菌殺死後再包埋於餌料生物再餵魚,確實不是一般死菌疫苗而是已包埋之死菌疫苗d.包埋是deliver vaccine之劑型

2、請問注射用的NNV亞單位疫苗您是用的NNV的哪個蛋白所謂保護性抗原的？

Coat protein
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 10:39
QQ網友問題：楊教授的疫苗生物包被技術是如何實現的？投餵過程疫苗的損失率是多少？有多少（比例）最終能進入魚體腸道刺激黏膜免疫反應？
作者: 張永安    時間: 2012-1-16 10:41
楊老師您好！
我想了解一下您研發NNV口服疫苗和注射用次單位疫苗的具體思路，也就是請您回複66樓的問題。

還有一個問題：請問您是用什麼來作selection marker的？
謝謝！
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:43
回復 47# 水寶寶


    2011年4 月，新聞報道臺灣成功大學與慕洋生技簽署優質石斑魚苗養殖系統技術轉移授權書，楊老師能否介紹一下“優質石斑魚苗養殖系統”？

A;請參閱po文之精緻石斑養殖系統
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:44
回復 41# lin9902057


    請參po文之精緻石斑養殖系統及其他答覆
作者: 老兵新傳    時間: 2012-1-16 10:44
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:47 編輯

鱖魚虹彩病毒中大和珠江所都在做，不知臺灣石斑魚虹彩病毒疫苗和鱖魚虹彩病毒疫苗能否通用？新加坡石斑魚虹彩病毒好像是蛙病毒屬，估計與臺灣石斑魚和鱖魚虹彩病毒差異較大。
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:48
回復 83# 張永安


    我想了解一下您研發NNV口服疫苗和注射用次單位疫苗的具體思路，也就是請您回複66樓的問題。

A. 口服疫苗在NNV最猖獗的魚苗階段才能用,但保護期短,注射疫苗保護期長.可減少施用次數

還有一個問題：請問您是用什麼來作selection marker的？
A. 容我保留一點商業機密
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 10:51
回復 86# 老兵新傳

手頭並無學術資料你的資訊應是正確.有一點自已的疑問，我們lab在臺灣也発現一些疑是彩虹的病魚用rtPCR查不出Irido而有NNV
作者: blackcarp    時間: 2012-1-16 10:51
還有一個問題：請問您是用什麼來作selection marker的？
A. 容我保留一點商業機密

作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 10:52
回復 86# 老兵新傳


    我剛看到南海海洋所也有做石斑魚虹彩病毒滅活疫苗
作者: 張永安    時間: 2012-1-16 10:53
本帖最后由 水寶寶 于 2012-1-16 10:55 編輯

回復 87# 楊惠郎


    謝謝楊老師的回複！

如果不涉及到商業機密的話，請問您用于制備NNV次單位疫苗的Coat protein具體是指哪一個蛋白？
作者: 細菌    時間: 2012-1-16 10:55
楊老師，你好。針對剛開口的魚苗進行免疫接種，會不會造成免疫耐受的問題。
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 11:00
各位童鞋，不好意思打擾一下，本次活動剩余的時間不多了，抓緊時間提問哦
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 11:01
回復 80# 水寶寶


    接下來您在石斑魚疫苗上還會開展哪些方面的研究？
A> 去年已退休,
1. 學術上、在成功大學已建立年青團隊傳承,

2. 在產業上已技轉慕洋生技公司量產SPR石斑魚苗,今年己建廠完成,現正開始生產三批,

3. 當高抗病力魚苗能大量供應後,也希輔導及協助養殖業者進入無用藥藥及對環境友善之石斑養殖方式,建立可永續經營之水產養殖產業
作者: 南海漁醫    時間: 2012-1-16 11:04
疫苗是個好東西，但在生產上大規模應用還有相當距離，當務之急應該是怎麼做到石斑魚帶毒而不發病。
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 11:06
回復 92# 細菌


    好問題.尚未有學術上具數據之答案.在使用17 dph之石斑魚苗上取得很好的保護力之實驗數據下，我們的猜測在魚苗之 胚胎階段可能尚無tolerance 之機制?
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 11:07
回復 95# 南海漁醫


    請參po文精緻石斑魚苗生產系統
作者: 水寶寶    時間: 2012-1-16 11:08
回復 94# 楊惠郎


    您已退休？真是看不出來，覺得您心態非常年輕！
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 11:10
回復 91# 張永安


    已発表二次在國際期刊,手頭無資料.若查不到煩請email給我,我可送電子檔給你
作者: 楊惠郎    時間: 2012-1-16 11:15
回復 95# 南海漁醫

更好的理想  是不帶病毒,也不會得病,更不會汙染養殖環境的養殖方法,社會需要永續經營並對地球友善的生產方式



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