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標(biāo)題: 水產(chǎn)噬弧菌之實踐意義 [打印本頁]

作者: 我愛養(yǎng)蝦    時間: 2012-2-2 12:33
標(biāo)題: 水產(chǎn)噬弧菌之實踐意義
雖  然噬弧菌在養(yǎng)蝦中的應(yīng)用已不是什么新鮮事,但是我們還是有必要就噬弧菌的現(xiàn)實意義進(jìn)行交流探討一起共同進(jìn)步。 一.噬弧菌使用時機。二.噬弧菌可否替代殺菌劑。三.噬弧菌與其他有益菌的配合使用.。四.使用頻率四。歡迎蝦米們踴躍發(fā)言!
作者: 511    時間: 2012-2-2 13:06
噬弧菌?概念來的吧
作者: 水寶寶    時間: 2012-2-2 15:20
噬菌弧菌──細(xì)菌的寄生菌


一般認(rèn)為海水具有殺菌作用,原因在于其所含的高鹽份,也有人說某些海藻可產(chǎn)生殺菌物質(zhì)。但是,將海水加熱滅菌或過濾后其殺菌效果遂降低,于是,有些微生物學(xué)者推測其中也有微生物參與作用。1967年美國麻省理工學(xué)院應(yīng)用微生物研究室發(fā)表研究報告指出,由海水份離的兩種微生物對于大腸桿菌(Escherichia coli)有致死效果。其中一種與大腸桿菌同時培養(yǎng)在洋菜平板上,會產(chǎn)生溶菌斑(plaque)。在顯微鏡下觀察,這種微生物為形體比一般細(xì)菌小、運動迅速的弧菌(Vibrio)。1975年,日本大阪市立環(huán)境科學(xué)研究院也發(fā)現(xiàn)在海水中有相似的微生物,對于常引起夏天集體中毒事件的腸炎弧菌(Vibrio parahaemolyticus)有顯著的致死效果。經(jīng)鑒定,這兩種對大腸桿菌、腸炎弧菌有致死效果的微生物均為特殊的寄生性細(xì)菌。這種細(xì)菌1962年才被發(fā)現(xiàn),并命名為噬菌弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)。目前我們已知海水中普遍存在著這種噬菌弧菌,隨季節(jié)的變化與腸炎弧菌族群有相似的消長關(guān)系。蘇俄也在1976年左右發(fā)表多篇有關(guān)噬菌弧菌在河川、污水凈化作用上所扮演角色的文章。

可能因發(fā)現(xiàn)較遲而且不是病原菌,一般微生物學(xué)書籍中對噬菌弧菌的敘述大多很簡短,甚至全無。國內(nèi)也僅少數(shù)專家曾注意到,但其獨特的生活方式在細(xì)菌界中是僅有的,在生命界中又是一奧秘所在。故本文對其作一般性介紹。

噬菌弧菌的發(fā)現(xiàn)及特征

噬菌弧菌為德國微生物學(xué)家史托普(H. Stolp)于1962年發(fā)現(xiàn)。由于此項發(fā)現(xiàn),她在1968年榮獲為紀(jì)念近代微生物學(xué)先驅(qū)──羅勃科霍(Robert Koch, 1843~1910)設(shè)立的「羅勃科霍獎」。

一般的細(xì)菌大小都在0.5μm以上,故研究上常以孔徑0.45μm的過濾膜濾除細(xì)菌。研究噬菌體(bacteriophage)時通常也是用這種過濾法將噬菌體和細(xì)菌份開。當(dāng)史托普的研究小組進(jìn)行由土壤篩選菜豆暈環(huán)葉燒病菌(Pseudomonas phaseolicola)的噬菌體時,將土壤懸浮液以孔徑0.45um的過濾膜過濾,然后與菜豆暈環(huán)葉燒病菌混合在洋菜平板上培養(yǎng)。噬菌體的溶菌斑通常在24小時內(nèi)可生成。很偶然地,她們在一批已棄置的培養(yǎng)皿上發(fā)現(xiàn)一些特殊的溶菌斑,要三、四天才出現(xiàn)而且一周內(nèi)會繼續(xù)擴(kuò)大。就已有的了解:噬菌體本身缺乏完整的代謝機能,必須感染寄主隨寄主菌的份裂一起復(fù)制DNA,才能繁殖。所以通常溶菌斑只在寄主菌繁殖的階段形成,而且形成后不會擴(kuò)大。因此她們推測這些后生成的溶菌斑可能不是由噬菌體形成。由一連串的實驗結(jié)果證實,這些特殊的溶菌斑確是由另一種微生物所形成;是一種形體較一般細(xì)菌小、未曾見諸文獻(xiàn)的寄生性細(xì)菌。就當(dāng)時所觀察到的寄生現(xiàn)象,史托普將之命名為Bdellovibrio bacteriovorus,屬名字頭來自希臘文Bdella,相當(dāng)英文leech、sucker,是水蛭、吸吮者之意,說它像水蛭一般吸附于寄主細(xì)胞表層吸食養(yǎng)份。(現(xiàn)已證實原觀察錯誤,實為穿過寄主菌體的細(xì)胞表層寄生于細(xì)胞壁與細(xì)胞膜間。)vibrio指其形狀為弧菌,bacteriovorus表示其為食細(xì)菌者。因為它與噬菌體相似,在寄主菌體內(nèi)繁殖導(dǎo)致寄主菌死亡,然后釋出長成的子細(xì)胞再感染其她菌體,以洋菜平板培養(yǎng)時形成溶菌斑,故本文稱之為噬菌弧菌。

噬菌弧菌有三類型菌株:寄生性株、腐生性株及兼性生長株(見圖一)。寄生性株可對寄主行掠奪式(predatory)寄生,形成溶菌斑(見圖二)。以一般份離噬菌體的方法可從自然界得到。在寄生性株中會出現(xiàn)失去寄生能力的腐生性株,機率為10-6~10-9。腐生性株可以用含蛋白質(zhì)的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。兼性生長株與寄主一起作洋菜平板培養(yǎng)時以溶菌圈出現(xiàn),如圖二中箭頭所指。在顯微鏡下觀察時透明圈處大多為寄生后溶解寄主菌所長成的弧菌,中央菌落則為腐生生長長成的桿狀或螺旋狀菌體,如圖一右側(cè)所繪。

史托普指出,噬菌弧菌的特征為:弧狀菌,寬0.3~0.45μm,長0.8~1.2μm,具備包有鞘膜的單極鞭毛,革蘭氏染色時為陰性反應(yīng),會侵入她種細(xì)菌體營寄生生長。生活周期中另有無鞭毛的螺旋狀營養(yǎng)體時期。生長時需要氧氣,只能利用有機碳源,尤其是蛋白質(zhì)?山(jīng)三羧酸循環(huán)(TCA cycle)代謝,但通常不能代謝醣類。

由于性狀特殊,份類上Bergey's Manual of Determinative Bacteriology第八版中將噬菌弧菌歸于未定屬的部份。

寄主范圍及與寄主的關(guān)系

通常噬菌弧菌的寄生不具嚴(yán)格菌株專一性,不像噬菌體只感染某一特定菌株。但有其寄主范圍,各菌株的寄主范圍可能有差異,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)可被寄生的僅限于革蘭氏陰性細(xì)菌:包括產(chǎn)氣桿菌屬(Aerobacter)、伊文氏桿菌屬(Erwinia)、鋸桿菌屬(Serratia)、沙門桿菌屬(Salmonella)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、黃色單胞菌屬(Xanthomonas)、定氮菌屬(Azotobacter)、根瘤菌屬(Rhizobium)、原野菌屬(Agrobacterium)、志賀桿菌屬(Shigella)、螺旋菌屬(Spirillum)、紫螺旋菌屬(Rhodospirillum)、大腸桿菌屬(Escherichia)、檸檬桿菌屬(Citrobacter)、腸桿菌屬(Enterobacter)、弧菌屬(Vibrio)、莫拉克斯菌屬(Moraxella)、發(fā)光菌屬(Photobacterium)、變形桿菌屬(Proteus)中的各菌種。對于革蘭氏陽性細(xì)菌、霉菌、酵母菌及動植物細(xì)胞尚未發(fā)現(xiàn)可寄生者。

噬菌弧菌與寄主間的關(guān)系可份為:寄主的辨識、吸附并鉆入、寄生繁殖及釋出長成的弧菌等階段。各階段進(jìn)行的機制并未完全清楚。

許多種細(xì)菌混合在一起培養(yǎng)時,噬菌弧菌會從中選擇其寄主進(jìn)行寄生。它先吸附至寄主表面,再藉菌體本身機械性「鉆」的力量及的水解在寄主菌體表層形成小孔并穿過。寄生于細(xì)胞壁與細(xì)胞膜之間,隔著細(xì)胞膜份解利用寄主的細(xì)胞內(nèi)容物。它先由弧菌增長成桿狀或螺旋狀菌體,再份裂成小型弧菌(請見圖一左側(cè)寄生性株的生長)。隨著它的生長,寄主菌體內(nèi)容物逐漸被份解而萎縮,終至僅余空殼。在相差顯微鏡(phase contrast microscope)下可見空殼內(nèi)部迅速運動的噬菌弧菌。最后有作用于殘余的細(xì)胞表層、釋出弧菌。圖三為相差顯微鏡下大腸桿菌被噬菌弧菌寄生后的變化情形:正常的大腸桿菌菌體如(a);被寄生后內(nèi)部的噬菌弧菌生長使菌體膨大如(b);寄生的噬菌弧菌份裂成小弧菌如(c)所見大型菌體內(nèi)的小黑點;弧菌長成后釋出于菌體四周,大腸桿菌僅存空殼如(d)。

由于它像噬菌體一般,在寄主菌體內(nèi)繁殖導(dǎo)致寄主死亡,故稱之為噬菌弧菌。但根本上,噬菌體利用寄主的代謝機能以繁殖,噬菌弧菌單純地以寄主菌體的成份為食物,是截然不同的。

結(jié)語

噬菌弧菌廣泛地份布于自然界,由土壤、水田、灌溉渠、陰溝、河川、湖泊、海水中均曾份離到。目前對其自然生態(tài)、形態(tài)及與寄主間的作用形式已有較多的認(rèn)識。生理機能、生化性質(zhì)方面所知有限。就學(xué)術(shù)上而言,是很好的研究題才。應(yīng)用方面,有許多文獻(xiàn)提出用它來進(jìn)行生物性控制的研究(即以菌制菌)。例如有人將噬菌弧菌注射至感染志賀氏桿菌(Shigella flexneri)的兔子眼睛中,結(jié)果抑制了角膜結(jié)膜炎的發(fā)生。也有許多人正在研究如何用它來對抗流水中的大腸菌類、腸內(nèi)有害微生物、養(yǎng)殖業(yè)、農(nóng)業(yè)上的病原菌等。更進(jìn)一步來說,造成它特殊生活方式的生理控制或系統(tǒng),說不定還有更高的利用價值!

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圖一:噬菌弧菌的生活週期。

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國二:噬菌弧菌形成的溶菌斑,箭頭所指為兼性生長株形成的溶菌圈。

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圖三:噬菌弧菌寄生後的大腸桿菌。(a)為正常的大腸稈菌菌體。被寄生後變化成如(b)再至(c)而(d)之形狀。
作者: 子皓    時間: 2012-2-2 19:02
回復(fù) 3# 水寶寶


    這是在實驗室做的試驗吧?在蝦塘復(fù)雜環(huán)境里的效果沒有這么好吧?
作者: 我愛養(yǎng)蝦    時間: 2012-2-2 20:57
有需要噬弧菌資料的快來吧!

噬菌蛭弧菌微生態(tài)制劑產(chǎn)品專題解.pdf

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水產(chǎn)用蛭弧菌微生物生態(tài)制劑——噬8使用注意事項.pdf

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蛭弧菌在對蝦養(yǎng)殖中應(yīng)用的探討.pdf

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作者: 我愛養(yǎng)蝦    時間: 2012-2-2 21:38
還有呢!一起分享

abbr_88835f0ca920f3e05e8a61e0ac74c508.pdf

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蛭弧菌、乳酸菌、蠟樣芽孢桿TWYB1.pdf

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作者: 阿水    時間: 2012-2-3 09:28
發(fā)揮更高的利用價值!
作者: mlhuanyao    時間: 2012-2-3 13:52
在低位池效果好,在高位池后期基本沒效果,后期大量大量使用會引起倒藻!
作者: 庸魚自擾    時間: 2012-2-3 23:14
本帖最后由 水寶寶 于 2012-2-18 15:06 編輯

水產(chǎn)論壇也有討論:

大致如下:
.1   蛭弧菌投入到水體,它所攻擊的幾乎是一切異養(yǎng)菌;
.2   蛭弧菌不僅能裂解大腸桿菌、沙門氏菌、副溶血弧菌等常見的細(xì)菌,還能寄生于變形桿菌屬、假單胞菌屬及氣單胞菌屬等一些病原菌,并且對病原菌的裂解能力明顯高于其他一些普通細(xì)菌。如果必須要排個先后順序的話,大概是:大腸桿菌、沙門氏菌、副溶血弧菌、嗜水氣單胞菌、假單胞菌等。而且以上病原菌少的時候還能裂解部分單細(xì)胞藻.
.3   蛭弧菌對于病原菌、生態(tài)菌的裂解速率相同。
.4   蛭弧菌在天然水體中也有它自己的致命殺手:蛭弧菌噬菌體,該噬菌體裂解蛭弧菌,維持水體菌相平衡。
作者: 水之旅程    時間: 2012-2-4 23:06
呵呵  實驗室里 應(yīng)該試驗過了  實踐操作中靜待效果
作者: 沙角養(yǎng)蝦    時間: 2012-2-17 12:25
請高人說說使用噬弧菌能否代替消毒劑啊
作者: hdg979    時間: 2012-5-4 10:22
蛭弧菌因生長周期長,效果不是很明顯




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