[病例209]河北唐山唐海縣十農(nóng)場(chǎng)一南美白對(duì)蝦池塘，面積10畝，水深1.3米，配備2臺(tái)增氧機(jī)。2012年5月15日放養(yǎng)蝦苗100萬(wàn)尾，5月31日放養(yǎng)蝦苗30萬(wàn)尾。沒(méi)套養(yǎng)魚類。
6月2日蝦開始有游塘、死亡，之后逐漸增多，到6月13日每天游塘、死亡的蝦達(dá)到幾百尾，高峰時(shí)一天最多死亡1000尾。每天都是下午大量游塘，特別下午3、4點(diǎn)鐘特別多，早晨很少見到游塘蝦。
6月13日上午10點(diǎn)到現(xiàn)場(chǎng)觀察池塘水色黃綠色，透明度約40 cm。鏡檢藻類以小型綠藻為主，用簡(jiǎn)易測(cè)試盒檢測(cè)水質(zhì)，pH值9.1（平時(shí)測(cè)定多在8.6~8.7），溶解氧5 mg/L，氨氮、亞硝酸測(cè)不出（見圖2）。發(fā)病游塘蝦普遍體色發(fā)紅，紅尾紅須，紅肝紅腸，空腸或腸道不飽滿，有的肝臟外觀模糊，有的尾部肌肉發(fā)白。
取游塘活蝦6尾（見圖3~4），現(xiàn)場(chǎng)接種肝臟做細(xì)菌分離培養(yǎng)和取肌肉病料帶回公司研究所用PCR方法做病毒檢測(cè)。結(jié)果有2尾病蝦分離到了細(xì)菌（見圖5）。病毒檢測(cè)結(jié)果，6尾病蝦白斑綜合癥病毒都呈陽(yáng)性，1尾皮下及造血器官壞死病毒呈陽(yáng)性，桃拉病毒都呈陰性（圖6）。
分析：發(fā)病蝦身體發(fā)紅，取樣的6尾游塘蝦病毒檢測(cè)都有白斑綜合癥病毒，游塘、死亡應(yīng)該是白斑綜合癥病毒引起。游塘?xí)r間主要發(fā)生在下午陽(yáng)光最強(qiáng)烈的時(shí)間，生物、水化指標(biāo)也具有氣泡病的發(fā)生條件，游塘蝦有的也有尾部肌肉發(fā)白的氣泡病癥狀，可見氣泡病加重了白斑綜合癥的游塘和死亡。（利洋公司技術(shù)部 唐紹林 利洋水產(chǎn)藥店十場(chǎng)店 于景艷提供 2012.08.02）
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tangsl:圖5為從南美白對(duì)蝦肝胰臟中接種少量組織,在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)皿上劃線，常溫下細(xì)菌培養(yǎng)，從細(xì)菌的分離結(jié)果來(lái)看，第1只蝦和第5只蝦肝胰臟中細(xì)菌較多。
圖6為南美白對(duì)蝦白斑癥病毒（WSSV）、桃拉病毒(TSV)和傳染性皮下與造血器官壞死病毒（IHHNV）PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))擴(kuò)增后，電泳結(jié)果圖。根據(jù)建立PCR檢查方法時(shí)引物設(shè)計(jì)，白斑癥病毒的預(yù)擴(kuò)增片段長(zhǎng)為296bp，桃拉病毒的預(yù)擴(kuò)增片段長(zhǎng)為231bp，傳染性皮下與造血器官壞死病毒的預(yù)擴(kuò)增片段長(zhǎng)為350bp。圖6中，第1個(gè)點(diǎn)樣孔為DL2000 DNA Marker（DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)），從上往下的片段長(zhǎng)依次為100bp，250bp，500bp，750bp，1000bp，2000bp。
第2至第7孔為6只蝦白斑癥病毒PCR檢測(cè)結(jié)果，從圖中可以看出，6只蝦樣品中均擴(kuò)增出比250bp稍大一些的片段，與預(yù)期擴(kuò)增片段（296bp）相符，因此，6只蝦均感染白斑癥病毒。
第8至第13孔為6只蝦傳染性皮下與造血器官壞死病毒PCR檢測(cè)結(jié)果，從圖中可以看出，6只蝦樣品中第6只擴(kuò)增出在250bp和500bp中間的片段，與預(yù)期擴(kuò)增片段（350bp）相符，因此，第6只蝦感染傳染性皮下與造血器官壞死病毒。
第14至第19孔為6只蝦桃拉病毒PCR檢測(cè)結(jié)果，從圖中可以看出，無(wú)片段擴(kuò)增出，6只蝦無(wú)桃拉病毒感染。
（注：bp是指堿基對(duì)，堿基對(duì)是一對(duì)相互匹配的堿基，即A：T， G：C，A：U相互作用，被氫鍵連接起來(lái)，是形成DNA、RNA單體以及編碼遺傳信息的化學(xué)結(jié)構(gòu)）
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