拜水安對草魚生長和肝臟保護(hù)效果評價(jià)

jeremy

各類維生素缺乏或比例失調(diào)，以及礦物元素不足和失衡會對魚類肝臟正常代謝造成不良影響，而草魚肝膽病的發(fā)生通常與飼料有關(guān)，甚至是首要因素

□文/西南大學(xué)水產(chǎn)動物繁育和健康養(yǎng)殖研究中心 江海燕 鄭宗林 吳宇 張宗祥

拜耳（四川）動物保健有限公司劉濤 姚瑞清

草魚肝膽病的發(fā)生通常與飼料有關(guān)，甚至是首要因素。目前投喂的人工配合飼料的蛋白質(zhì)含量大多在24-30％之間，粗纖維含量一般小于12％。蛋白質(zhì)的大量攝入，促進(jìn)了草魚的快速生長。雖然滿足了營養(yǎng)需求，但草魚腹部呈膨大狀，體形粗而短，與食草草魚相比胸圍與體長之比偏大，失去了早先固有的細(xì)長條的優(yōu)美體態(tài)。另外部分蛋白質(zhì)在魚體內(nèi)被轉(zhuǎn)化成了脂肪，堆積在腸系及肝部周圍，加重了肝臟的負(fù)擔(dān)，直至形成脂肪肝；另一方面，人工配合飼料由于經(jīng)過高溫高壓蒸煮后，原料中所含的維生素等破壞損失較多，各類維生素缺乏或比例失調(diào)，以及礦物元素的不足和失衡同樣會對肝臟的正常代謝功能造成不良影響和損害。本試驗(yàn)擬在草魚飼料中補(bǔ)充一定量的以礦物元素為主要有效成分的魚類促長保肝類產(chǎn)品—拜水安（BSA），判定其對草魚生長和肝臟的保護(hù)效果。

1、材料與方法

1.1試驗(yàn)魚及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)用草魚（Ctenopharyngodon idellus）為當(dāng)年人工繁殖的同一批苗種，購自重慶市榮昌縣梅石壩漁場，試驗(yàn)在西南大學(xué)水產(chǎn)系室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行。試驗(yàn)前暫養(yǎng)1周，試驗(yàn)采用的養(yǎng)殖設(shè)施為長方形玻璃缸（總體積0.4m3，水體體積0.3m3）。養(yǎng)殖試驗(yàn)期間均連續(xù)充氧（除投餌期間外）。試驗(yàn)開始前停飼24 h，選擇體重相近(30.0±1.5)g，體格健壯的草魚魚種600尾，隨機(jī)分配于15個養(yǎng)殖缸，每缸40尾。試驗(yàn)分5個處理組，分別為陽性對照組、陰性對照組、BS1組（BSA500g/t飼料）、BS2組（BSA1000g/t飼料）和BS3組（BSA2000g/t飼料）。每天早、中、晚投喂3次，至飽食，投喂結(jié)束后30min，吸出池內(nèi)殘餌及糞便。試驗(yàn)期間水溫25.0±1.0℃，pH7.5±0.5，溶氧≥5mg/L，氨氮<0.2mg/L，余氯<0.1mg/L，養(yǎng)殖試驗(yàn)共進(jìn)行56天。

試驗(yàn)前預(yù)先測定草魚96h的Cu2+半數(shù)致死濃度(LC50)，本試驗(yàn)條件下的96h LC50為(0.82±0.13)mg·L-1，根據(jù)LC50設(shè)計(jì)Cu2+含量梯度再進(jìn)行藥物性肝病造模試驗(yàn)，選擇肝病現(xiàn)象明顯、酶學(xué)指標(biāo)變化顯著的0.21mg·L-1(Cu2+含量)作為肝病模型的造模濃度。養(yǎng)殖第3周，將陽性對照、BS1、BS2和BS3組的草魚浸浴于0.21mg·L-1 (Cu2+含量)的硫酸銅液體中4天，每天換液以保證溶液濃度。硫酸銅浸浴期間，飼料投喂暫停，間歇充氧，浸浴結(jié)束后，置于無硫酸銅的水體中飼養(yǎng)至第8周試驗(yàn)結(jié)束。

1.2試驗(yàn)飼料

配制飼料前，飼料原料均經(jīng)粉碎機(jī)粉碎并全部過60目篩，制成直徑為1.5mm左右的顆粒飼料，在30℃鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)干燥24 h，置冰箱0℃保存。“拜水安（BSA）”產(chǎn)品由拜耳（四川）動物保健有限公司提供。具體配方組成和營養(yǎng)成分分析見表1。

1.3 指標(biāo)測定

8周養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，按如下要求或規(guī)程測定相應(yīng)的生長、胃腸酶活性和肝酶指標(biāo)等。

1.3.1 生長速度

鮮重魚質(zhì)量變化、增重率和特定生長率等表示生長速度。

1.3.2 飼料利用效率

以飼料系數(shù)和蛋白效率表示。

1.3.3 全魚營養(yǎng)成分測定

試驗(yàn)結(jié)束每處理組取9尾魚，進(jìn)行全魚營養(yǎng)成分分析。魚體肌肉常規(guī)成分分析均用AOAC方法。其中水分采用105℃烘箱干燥恒重法，粗蛋白質(zhì)采用凱式定氮法（總氮×6.25），粗脂肪采用索氏抽提法(以乙醚為抽提液)，粗灰分采用馬福爐中灼燒法(550℃)。

1.3.4 形體指標(biāo)

以肥滿度、內(nèi)臟指數(shù)（內(nèi)臟重與體重比）、肝胰指數(shù)（肝胰臟重與體重的比）等指標(biāo)對魚體形態(tài)進(jìn)行評價(jià)。

1.3.5 消化酶活性測定

脂肪酶活性測定：采用聚乙烯醇橄欖油乳化液水解法；蛋白酶活性測定：采用福林-酚試劑法。

1.3.6 肝臟抗氧化活性測定

4℃條件下，肝臟樣品經(jīng)離心（600×g）后，取上清液用于各指標(biāo)測定。采用南京建成生物技術(shù)研究所的試劑盒測定超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、丙二醛（MDA）和溶菌酶（LSZ）的含量或活性。

1.3.7 肝組織顯微病理學(xué)研究

在冰盤中剖殺試驗(yàn)草魚，取肝臟，Bouin`s液固定，石蠟包埋，切片5 μm，HE染色，光鏡觀察。

1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析(ANOVA)，處理間若有顯著差異，再作Duncan’s多重比較，P<0.05表示差異顯著。

2、試驗(yàn)結(jié)果

2.1 對生產(chǎn)性能的影響

草魚經(jīng)硫酸銅肝病造模之后，陽性對照組的草魚增重率、特定生長率、蛋白效率和成活率最低，顯著低于陰性對照組和BSA補(bǔ)充組（P<0.05），且隨著BSA添加量的增加，各指標(biāo)都有提高趨勢；但除BS3組的增重率比陰性對照顯著提高外（P<0.05），其余各BS組的增重率、特定生長率、蛋白效率和成活率與陰性對照無顯著差異（P>0.05）。BS組與陰性對照組之間的草魚飼料系數(shù)無顯著差異（P>0.05），但均顯著低于陽性對照組（P<0.05）（表2）。

2.2 對全魚營養(yǎng)成分和肝脂的影響

肝病造模及BSA對全魚粗脂肪和水分都沒有顯著影響，但BSA對全魚粗蛋白含量較陽性對照組顯著提高（P<0.05）。肝病造模后的陽性對照的肝脂含量顯著高于其余各組，而BSA的補(bǔ)充顯著降低了肝脂含量（P<0.05）（表3）。

2.3 對草魚形體的影響

陽性對照的肥滿度顯著低于陰性對照和BS組（P<0.05），且隨著BSA的增加，肥滿度有提高趨勢，但除BS3組的肥滿度比陰性對照顯著提高外（P<0.05），其余各BS組的肥滿度與陰性對照無顯著差異（P>0.05）。陽性對照的草魚肝體指數(shù)和內(nèi)臟指數(shù)顯著高于陰性對照和BS組（P<0.05），但BS組與陰性對照無顯著差異（P>0.05）（表4）。

2.4 對草魚肝酶的影響

試驗(yàn)以草魚肝臟超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）活性，及丙二醛（MDA）生成量來判定其抗氧化性能（表5）。肝病造模和BSA的補(bǔ)充對草魚肝CAT活性無顯著影響（P>0.05），而肝病造模導(dǎo)致陽性對照草魚肝MDA生成量和SOD活性比陰性對照和BSA補(bǔ)充組顯著提高（P<0.05）；補(bǔ)充BSA后，草魚肝谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GPT）和溶菌酶（LSZ）活性比陽性對照有顯著降低，比陰性對照略有提高。

2.5 對草魚胃腸消化酶的影響

陰性對照組的草魚前腸和中腸的蛋白酶活性與陽性對照組和BS組間均無顯著差異（P>0.05），后腸和胃蛋白酶活性隨BSA的補(bǔ)充有明顯的上升趨勢，其中BS3組的后腸和胃蛋白酶活性顯著高于兩個對照組（P<0.05）（表6）。

BSA的補(bǔ)充提高了草魚腸道脂肪酶的活性，BS3組的草魚前、中和后腸脂肪酶活性比對照組都有顯著提高（P<0.05），但各組間胃脂肪酶活性無顯著差異（P>0.05）（表7）。

2.6 BSA對草魚肝臟的影響

用硫酸銅造肝病模型后，陽性對照組草魚肝組織糜爛，壞死，肝細(xì)胞崩解，細(xì)胞核消失（見后插彩頁圖2）；陰性對照組草魚肝細(xì)胞索結(jié)構(gòu)完整，肝細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞結(jié)構(gòu)較清晰（見后插彩頁圖3）；同樣肝病造模后，在BS1組草魚肝細(xì)胞變得相對正常，但肝細(xì)胞索結(jié)構(gòu)發(fā)生變異，結(jié)構(gòu)不完整（見后插彩頁圖4）；BS2組草魚肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，但排列不夠整齊，肝細(xì)胞有輕微病變，部分扭曲（見后插彩頁圖5）；BS3組草魚肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，胰島結(jié)構(gòu)清晰完整，細(xì)胞排列整齊（見后插彩頁圖6）。

3、小結(jié)

3.1 BSA對草魚生產(chǎn)性能的影響

試驗(yàn)第3周草魚進(jìn)行肝病造模后，與未肝病造模（陰性對照）相比，造模組（陽性對照）的各項(xiàng)生長性能指標(biāo)均顯著降低，飼料利用率下降。在肝病造模的情況下，草魚飼料中補(bǔ)充BSA（500-2000g/t飼料）后，其生長性能各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著改善，甚至BS3組的草魚增重率、蛋白效率等較陰性對照（未造模）還有顯著提高。

3.2 BSA對草魚全魚營養(yǎng)成分和肝脂的影響

肝病造模及飼料中補(bǔ)充BSA對草魚全魚粗脂肪和水分無顯著影響，但卻顯著降低了全魚蛋白的含量，并顯著增加了肝脂的含量。

3.3 BSA對草魚形體的影響

草魚進(jìn)行肝病造模后，其肝胰指數(shù)和內(nèi)臟指數(shù)均比陰性對照組顯著提高，且肥滿度降低；但補(bǔ)充BSA后，其肥滿度得到顯著提高，肝胰指數(shù)和內(nèi)臟指數(shù)都有顯著下降。

3.4 BSA對草魚肝酶的影響

CAT活性未受肝病造模和BSA補(bǔ)充的影響；而肝病造模導(dǎo)致陽性對照組草魚肝MDA生成量和SOD活性比陰性對照組和BSA補(bǔ)充組顯著提高；補(bǔ)充BSA后，草魚肝GOT、GPT和LSZ活性比陽性對照有顯著降低，比陰性對照略有提高。

3.5 BSA對草魚胃腸消化酶的影響

肝病造模后，與陽性對照組相比，BSA的補(bǔ)充顯著增加了草魚胃和后腸的蛋白酶活性，同時(shí)對腸道的脂肪酶活性也有顯著提高。

3.6 BSA對草魚肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)影響

組織切片結(jié)果表明，肝病造模引起草魚肝臟較嚴(yán)重的損傷，但飼料中補(bǔ)充BSA后，對肝病的恢復(fù)有顯著的作用。

4、結(jié)論

飼料中補(bǔ)充BSA（500-2000g/t飼料）后，可促進(jìn)草魚生長性能和飼料效率的提高，并對肝臟有較明顯的保護(hù)作用。

（本刊原創(chuàng)稿件，轉(zhuǎn)載須注明出處，違者必究！）

oscar

很詳細(xì)，有需要的人可以嘗試一下。

yonglee546

一般人是沒那個條件去做的，不過凡事不可過急

zgg496404854

可以試下  謝謝分享