水產噬弧菌之實踐意義

我愛養(yǎng)蝦

雖  然噬弧菌在養(yǎng)蝦中的應用已不是什么新鮮事，但是我們還是有必要就噬弧菌的現(xiàn)實意義進行交流探討一起共同進步。 一.噬弧菌使用時機。二.噬弧菌可否替代殺菌劑。三.噬弧菌與其他有益菌的配合使用.。四.使用頻率四。歡迎蝦米們踴躍發(fā)言！

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噬弧菌？概念來的吧

水寶寶

噬菌弧菌──細菌的寄生菌


一般認為海水具有殺菌作用，原因在于其所含的高鹽份，也有人說某些海藻可產生殺菌物質。但是，將海水加熱滅菌或過濾后其殺菌效果遂降低，于是，有些微生物學者推測其中也有微生物參與作用。1967年美國麻省理工學院應用微生物研究室發(fā)表研究報告指出，由海水份離的兩種微生物對于大腸桿菌（Escherichia coli）有致死效果。其中一種與大腸桿菌同時培養(yǎng)在洋菜平板上，會產生溶菌斑（plaque）。在顯微鏡下觀察，這種微生物為形體比一般細菌小、運動迅速的弧菌（Vibrio）。1975年，日本大阪市立環(huán)境科學研究院也發(fā)現(xiàn)在海水中有相似的微生物，對于常引起夏天集體中毒事件的腸炎弧菌（Vibrio parahaemolyticus）有顯著的致死效果。經鑒定，這兩種對大腸桿菌、腸炎弧菌有致死效果的微生物均為特殊的寄生性細菌。這種細菌1962年才被發(fā)現(xiàn)，并命名為噬菌弧菌（Bdellovibrio bacteriovorus）。目前我們已知海水中普遍存在著這種噬菌弧菌，隨季節(jié)的變化與腸炎弧菌族群有相似的消長關系。蘇俄也在1976年左右發(fā)表多篇有關噬菌弧菌在河川、污水凈化作用上所扮演角色的文章。

可能因發(fā)現(xiàn)較遲而且不是病原菌，一般微生物學書籍中對噬菌弧菌的敘述大多很簡短，甚至全無。國內也僅少數(shù)專家曾注意到，但其獨特的生活方式在細菌界中是僅有的，在生命界中又是一奧秘所在。故本文對其作一般性介紹。

噬菌弧菌的發(fā)現(xiàn)及特征

噬菌弧菌為德國微生物學家史托普（H. Stolp）于1962年發(fā)現(xiàn)。由于此項發(fā)現(xiàn)，她在1968年榮獲為紀念近代微生物學先驅──羅勃科霍（Robert Koch, 1843～1910）設立的「羅勃科霍獎」。

一般的細菌大小都在0.5μm以上，故研究上常以孔徑0.45μm的過濾膜濾除細菌。研究噬菌體（bacteriophage）時通常也是用這種過濾法將噬菌體和細菌份開。當史托普的研究小組進行由土壤篩選菜豆暈環(huán)葉燒病菌（Pseudomonas phaseolicola）的噬菌體時，將土壤懸浮液以孔徑0.45um的過濾膜過濾，然后與菜豆暈環(huán)葉燒病菌混合在洋菜平板上培養(yǎng)。噬菌體的溶菌斑通常在24小時內可生成。很偶然地，她們在一批已棄置的培養(yǎng)皿上發(fā)現(xiàn)一些特殊的溶菌斑，要三、四天才出現(xiàn)而且一周內會繼續(xù)擴大。就已有的了解：噬菌體本身缺乏完整的代謝機能，必須感染寄主隨寄主菌的份裂一起復制DNA，才能繁殖。所以通常溶菌斑只在寄主菌繁殖的階段形成，而且形成后不會擴大。因此她們推測這些后生成的溶菌斑可能不是由噬菌體形成。由一連串的實驗結果證實，這些特殊的溶菌斑確是由另一種微生物所形成；是一種形體較一般細菌小、未曾見諸文獻的寄生性細菌。就當時所觀察到的寄生現(xiàn)象，史托普將之命名為Bdellovibrio bacteriovorus，屬名字頭來自希臘文Bdella，相當英文leech、sucker，是水蛭、吸吮者之意，說它像水蛭一般吸附于寄主細胞表層吸食養(yǎng)份。（現(xiàn)已證實原觀察錯誤，實為穿過寄主菌體的細胞表層寄生于細胞壁與細胞膜間。）vibrio指其形狀為弧菌，bacteriovorus表示其為食細菌者。因為它與噬菌體相似，在寄主菌體內繁殖導致寄主菌死亡，然后釋出長成的子細胞再感染其她菌體，以洋菜平板培養(yǎng)時形成溶菌斑，故本文稱之為噬菌弧菌。

噬菌弧菌有三類型菌株：寄生性株、腐生性株及兼性生長株（見圖一）。寄生性株可對寄主行掠奪式（predatory）寄生，形成溶菌斑（見圖二）。以一般份離噬菌體的方法可從自然界得到。在寄生性株中會出現(xiàn)失去寄生能力的腐生性株，機率為10-6~10-9。腐生性株可以用含蛋白質的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。兼性生長株與寄主一起作洋菜平板培養(yǎng)時以溶菌圈出現(xiàn)，如圖二中箭頭所指。在顯微鏡下觀察時透明圈處大多為寄生后溶解寄主菌所長成的弧菌，中央菌落則為腐生生長長成的桿狀或螺旋狀菌體，如圖一右側所繪。

史托普指出，噬菌弧菌的特征為：弧狀菌，寬0.3～0.45μm，長0.8～1.2μm，具備包有鞘膜的單極鞭毛，革蘭氏染色時為陰性反應，會侵入她種細菌體營寄生生長。生活周期中另有無鞭毛的螺旋狀營養(yǎng)體時期。生長時需要氧氣，只能利用有機碳源，尤其是蛋白質。可經三羧酸循環(huán)（TCA cycle）代謝，但通常不能代謝醣類。

由于性狀特殊，份類上Bergey's Manual of Determinative Bacteriology第八版中將噬菌弧菌歸于未定屬的部份。

寄主范圍及與寄主的關系

通常噬菌弧菌的寄生不具嚴格菌株專一性，不像噬菌體只感染某一特定菌株。但有其寄主范圍，各菌株的寄主范圍可能有差異。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)可被寄生的僅限于革蘭氏陰性細菌：包括產氣桿菌屬（Aerobacter）、伊文氏桿菌屬（Erwinia）、鋸桿菌屬（Serratia）、沙門桿菌屬（Salmonella）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、黃色單胞菌屬（Xanthomonas）、定氮菌屬（Azotobacter）、根瘤菌屬（Rhizobium）、原野菌屬（Agrobacterium）、志賀桿菌屬（Shigella）、螺旋菌屬（Spirillum）、紫螺旋菌屬（Rhodospirillum）、大腸桿菌屬（Escherichia）、檸檬桿菌屬（Citrobacter）、腸桿菌屬（Enterobacter）、弧菌屬（Vibrio）、莫拉克斯菌屬（Moraxella）、發(fā)光菌屬（Photobacterium）、變形桿菌屬（Proteus）中的各菌種。對于革蘭氏陽性細菌、霉菌、酵母菌及動植物細胞尚未發(fā)現(xiàn)可寄生者。

噬菌弧菌與寄主間的關系可份為：寄主的辨識、吸附并鉆入、寄生繁殖及釋出長成的弧菌等階段。各階段進行的機制并未完全清楚。

許多種細菌混合在一起培養(yǎng)時，噬菌弧菌會從中選擇其寄主進行寄生。它先吸附至寄主表面，再藉菌體本身機械性「鉆」的力量及的水解在寄主菌體表層形成小孔并穿過。寄生于細胞壁與細胞膜之間，隔著細胞膜份解利用寄主的細胞內容物。它先由弧菌增長成桿狀或螺旋狀菌體，再份裂成小型弧菌（請見圖一左側寄生性株的生長）。隨著它的生長，寄主菌體內容物逐漸被份解而萎縮，終至僅余空殼。在相差顯微鏡（phase contrast microscope）下可見空殼內部迅速運動的噬菌弧菌。最后有作用于殘余的細胞表層、釋出弧菌。圖三為相差顯微鏡下大腸桿菌被噬菌弧菌寄生后的變化情形：正常的大腸桿菌菌體如（a）；被寄生后內部的噬菌弧菌生長使菌體膨大如（b）；寄生的噬菌弧菌份裂成小弧菌如（c）所見大型菌體內的小黑點；弧菌長成后釋出于菌體四周，大腸桿菌僅存空殼如（d）。

由于它像噬菌體一般，在寄主菌體內繁殖導致寄主死亡，故稱之為噬菌弧菌。但根本上，噬菌體利用寄主的代謝機能以繁殖，噬菌弧菌單純地以寄主菌體的成份為食物，是截然不同的。

結語

噬菌弧菌廣泛地份布于自然界，由土壤、水田、灌溉渠、陰溝、河川、湖泊、海水中均曾份離到。目前對其自然生態(tài)、形態(tài)及與寄主間的作用形式已有較多的認識。生理機能、生化性質方面所知有限。就學術上而言，是很好的研究題才。應用方面，有許多文獻提出用它來進行生物性控制的研究（即以菌制菌）。例如有人將噬菌弧菌注射至感染志賀氏桿菌（Shigella flexneri）的兔子眼睛中，結果抑制了角膜結膜炎的發(fā)生。也有許多人正在研究如何用它來對抗流水中的大腸菌類、腸內有害微生物、養(yǎng)殖業(yè)、農業(yè)上的病原菌等。更進一步來說，造成它特殊生活方式的生理控制或系統(tǒng)，說不定還有更高的利用價值！



圖一：噬菌弧菌的生活週期。


國二：噬菌弧菌形成的溶菌斑，箭頭所指為兼性生長株形成的溶菌圈。



圖三：噬菌弧菌寄生後的大腸桿菌。（a）為正常的大腸稈菌菌體。被寄生後變化成如（b）再至（c）而（d）之形狀。

子皓

回復 3# 水寶寶


    這是在實驗室做的試驗吧？在蝦塘復雜環(huán)境里的效果沒有這么好吧？

我愛養(yǎng)蝦

有需要噬弧菌資料的快來吧！

我愛養(yǎng)蝦

還有呢！一起分享

阿水

發(fā)揮更高的利用價值！

mlhuanyao

在低位池效果好，在高位池后期基本沒效果，后期大量大量使用會引起倒藻！

庸魚自擾

水產論壇也有討論：

大致如下：
.1   蛭弧菌投入到水體，它所攻擊的幾乎是一切異養(yǎng)菌;
.2   蛭弧菌不僅能裂解大腸桿菌、沙門氏菌、副溶血弧菌等常見的細菌，還能寄生于變形桿菌屬、假單胞菌屬及氣單胞菌屬等一些病原菌，并且對病原菌的裂解能力明顯高于其他一些普通細菌。如果必須要排個先后順序的話，大概是：大腸桿菌、沙門氏菌、副溶血弧菌、嗜水氣單胞菌、假單胞菌等。而且以上病原菌少的時候還能裂解部分單細胞藻.
.3   蛭弧菌對于病原菌、生態(tài)菌的裂解速率相同。
.4   蛭弧菌在天然水體中也有它自己的致命殺手：蛭弧菌噬菌體，該噬菌體裂解蛭弧菌，維持水體菌相平衡。

水之旅程

呵呵  實驗室里 應該試驗過了  實踐操作中靜待效果

沙角養(yǎng)蝦

請高人說說使用噬弧菌能否代替消毒劑啊

hdg979

蛭弧菌因生長周期長，效果不是很明顯