魚食性與腸道菌群關系的初步研究

cjlittlepig

摘自《水產科學》

摘　要：對淡水養殖池中的烏鱧、鰱魚、鳊魚、鯽魚不同食性魚的后腸菌群進行了定性、定量分析，結果表明：四種魚的后腸壁和后腸內容物都是厭氧菌總數遠大于好氧菌總數；后腸內容物菌數遠大于后腸壁菌數；不同的魚，后腸壁的好氧菌總數差別很大，而厭氧菌總數差別不大；后腸內容物中的厭氧菌總數和好氧菌總數為：烏鱧> 鯽魚> 鰱魚> 鳊魚；而后腸壁細菌含量與食物沒有明顯的關系；后腸內容物和后腸壁中的雙歧桿菌數為：烏鱧> 鯽魚> 鰱魚> 鳊魚。表明后腸內容物中的細菌總數、后腸內容物和后腸壁中的雙歧桿菌數都與食性相關。大腸桿菌、腸球菌和乳酸菌在后腸的分布沒有規律，說明它們與食物相關性不強。

關鍵詞：食性；魚；腸道；菌群；好氧菌；厭氧菌；雙歧桿菌

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    對魚類腸道菌群組成的研究，國外曾有一些報道，但未見比較系統的研究。早在1953 年，Margolis發現禁食對魚腸道菌有影響[1]。1976年Yoshimizu等對魚腸道沙門氏菌進行了研究[2]。1985年Haruo等對淡水養殖池中羅非魚、金魚、鯉魚等的腸道菌作了研究，指出了魚腸道存在好氧或兼性厭氧菌、專性厭氧菌[3]。1987年Haruo報道淡水養殖池中弧菌—氣單胞菌的穩定，而其它細菌受外界環境因素的影響較大[4]。但Hansen認為魚類腸道不一定存在穩定的細菌群落[5]。目前，比較統一的認識是魚類腸道存在細菌。國內對魚類腸道菌群的研究起步相對較晚，主要集中在條件致病菌與腸道菌群關系的研究[6，、外界因素對腸道菌群影響的研究[8～和腸道菌群對宿主的消化和生長的影響研究[11，等，這些研究說明腸道菌群對魚類的抗病、生長和發育有重要的意義。但幾乎所有的研究都以腸道內容物為研究對象，對腸壁菌群的研究極少，對腸壁與腸道內容物關系的研究則沒有。并且，大多數研究以好氧菌為研究對象，對厭氧菌的研究較少。趙慶新等發現不同亞科的魚間菌群有較大的差異[13]，但這些差異由哪些因素引起，魚食性影響腸道消化殘渣，是否因此而影響居于腸道的菌群，值得探討。本實驗以4 種不同食性的魚的后腸壁和后腸內容物中的2 種好氧菌、2 種厭氧菌以及好氧菌總數、厭氧菌總數為研究對象，試圖揭示腸道壁與腸道內容物的菌群(包括好氧菌和厭氧菌) 之間的關系、魚腸道菌群與食性的關系，以期為水產魚類腸道菌群研究提供一些基礎數據。

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1 材料與方法

1.1材料選擇
    以4 種不同食性的魚為實驗材料：食浮游植物食的鰱魚、草食性的鳊魚、肉食性的烏鱧以及雜食性的鯽魚。樣本采集于紹興文理學院生物系淡水養殖場。體重013～015 kg ，體內外均無傷病，腸道充盈度較好。每種魚3 條，重復3 次。

1.2菌液的制備
    魚體隨機采集后，用75 %酒精進行魚體消毒。無菌條件下解剖，取出腸道。75 %酒精棉球擦拭腸管外壁，無菌水反復沖洗，用無菌棉線結扎中腸與后腸、后腸與肛門交界處。剖開后腸，取內含物015 g。再用無菌水將后腸壁沖洗3 遍，剪碎，稱取011 g 放入裝有玻璃珠的三角瓶內。再分別稀釋得到10- 2 ，10- 3 ，10- 4 ，10- 5 ，10- 6 ，10- 7 ，10- 8稀釋液。

1.3細菌的分離培養
    選用國內外學者常用的幾種培養基進行好氧菌總數和厭氧菌總數以及各種腸道細菌的分離培養[7，8，10，14](表1) 。

1.4細菌的計數及鑒定
    經FWA ，EG培養后選菌落數在30～300 個之間的平板進行好氧菌總數和厭氧菌總數計數，并換算成每克樣品所含菌數量(cfu/ g) 。
        4 種細菌的鑒定及定量按康白等介紹的方法進行[7，8，14，。先鑒定4 種選擇性培養基的選擇性：對每個選擇性培養基平板選6個典型菌落進行菌落特征、細菌形態及生理生化特性鑒定，結果證明4種選擇性培養基具有高度選擇性，即各選擇性培養基上的典型菌落就是所需菌落。再對每種培養基上的典型菌進行平板菌落計數，并換算成每克樣品所含菌數量(cfu/ g) 。

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2 結果與討論
    菌群測定的定量結果見表2 。
    由表2可知：各種魚的后腸壁和后腸內容物都是厭氧菌總數遠大于好氧菌總數，厭氧菌是腸道菌群的主要組成成分；好氧菌總數、厭氧菌總數、腸球菌、大腸桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌都是后腸內容物的遠大于后腸壁，說明細菌的生長繁殖場所主要在腸腔。
    不同種魚后腸壁的好氧菌總數差別很大(如鰱魚后腸壁好氧菌總數是鯽魚后腸壁好氧菌總數的58倍) ，而厭氧菌總數差別不大(最大數鳊魚與最小數鰱魚之間的比值僅為214 倍) 。人腸道菌群在腸道有3個生物層，深層為厭氧菌并和腸壁共生形成生物膜，中層為一些厭氧菌，表層為好氧菌游動于腸腔[16]。魚類可能也有厭氧菌與腸壁共生形成生物膜，因此含量穩定，而好氧菌可游離于腸腔中間，因此在腸壁的隨機波動性很大。
        4 種魚的后腸內容物中的厭氧菌總數和好氧菌總數為肉食性的烏鱧> 雜食性的鯽魚> 以浮游植物為食的鰱魚> 草食性的鳊魚，說明后腸內容物細菌數量和食物的種類有關，也間接的說明后腸內容物的細菌是靠吸收后腸內容物中的養分生存。4 種不同食性魚后腸壁細菌含量與食物種類沒有明顯的關系。
        4 種不同食性魚腸道的后腸內容物和后腸壁中的雙歧桿菌都是：肉食性的烏鱧> 雜食性的鯽魚>以浮游植物為食的鰱魚> 草食性的鳊魚，這4 種魚的壽命長短也是烏鱧> 鯽魚> 鰱魚> 鳊魚，許多研究表明雙歧桿菌與生物的壽命成正相關[17，，這里也體現了這種相關性，同時說明雙歧桿菌的數量與食物種類有關系，肉類食物比植物類食物更適宜雙歧桿菌生長，更有利于長壽。大腸桿菌、腸球菌和乳酸菌在后腸的分布沒有規律，說明它們與食物的相關性不強。

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華農小漁民

這篇文章作者是誰呢？
華中農業大學陳孝煊做魚類腸道微生物做的比較多。

cjlittlepig

華農小漁民 發表于 2012-8-7 21:14
這篇文章作者是誰呢？
華中農業大學陳孝煊做魚類腸道微生物做的比較多。

作者清單：尹軍霞, 張建龍, 沈文英, 石巧紅, 顧海鳳。
你是陳孝煊的學生吧？對他這么了解？你是做哪方面研究的呀？我們交流交流，啊啊。