病毒性神經(jīng)壞死病毒繼發(fā)感染哈維氏弧菌引起青斑黑身、趴底死亡一例

玉。

[病例290]
        海南省文昌市會文鎮(zhèn)一室內(nèi)青斑育苗水泥池，循環(huán)水養(yǎng)殖（見圖1），2014年4月28日放苗2萬尾，5月2日開始出現(xiàn)漲肚子、黑身、趴底死亡，用過一些營養(yǎng)保健藥物，效果不十分明顯。到5月9日，池中還剩下約3000~4000尾魚苗。

       2014年5月9日上午11點到現(xiàn)場，可見池底有大量黑身的魚，趴底，活力差（見圖2），測定水溫28℃。從池中取出2尾魚，一尾外觀正常的魚，一尾呈“黑身”的魚（見圖3）。將取的兩尾魚剪斷尾巴，從血液中接種進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，并將整尾魚用95%酒精浸泡做病毒檢測。

       結(jié)果：兩尾魚均能檢測出病毒性神經(jīng)壞死病毒，且病毒粒子含量高（見圖4）。正常魚的血液中未分離出細(xì)菌，黑身魚的血液中分離出大量的細(xì)菌（見圖5），經(jīng)過16S rDNA測序鑒定，該分離菌為哈維氏弧菌（Vibrio harveyi）。

       分析：1、近年石斑魚育苗過程中由病毒性神經(jīng)壞死病毒引起的“黑身”、“趴底”，死亡發(fā)病率非常高，危害也很大，嚴(yán)重者一夜之間死亡率達(dá)100%，該病毒主要危害幼魚和仔魚，對成魚危害不大。發(fā)病后常常繼發(fā)細(xì)菌感染，加重死亡。


       2、病毒性神經(jīng)壞死病毒病主要通過親魚垂直傳播，魚卵的帶毒率高，目前該病沒有有效治療方法，通過提前處理水質(zhì)，育苗過程中保持環(huán)境穩(wěn)定，減少發(fā)病的誘發(fā)因素，可以減少該病的發(fā)生和降低死亡率。（利洋研究所 雷燕 王惠儒 利洋會文店 程寧提供 2014.07.03）

南海漁醫(yī)

5月初煙堆和馮家灣這次斑苗大面積的死亡，很值得商榷，并不是簡單的神經(jīng)壞死病毒或弧菌感染，這次病害發(fā)生在大雨后的一兩天，主要是黑身爬底，接著大量死亡，幾天內(nèi)很多場不管大小苗的青斑和珍珠都損失超過5成，沒爬底的也呈一定消瘦，大約5月10-15號左右才普遍穩(wěn)定，我去采樣的時候是20號，調(diào)查了7-8個場，這個時候黑身爬底的已經(jīng)很少了，但也采了發(fā)病后兩個場的幾條青斑和珍珠，聽幾個場主介紹，這次病害的黑身與神經(jīng)壞死病毒病的癥狀完全不同，幾乎沒見在水面?zhèn)扰P“飄”的，而且大小苗都同時發(fā)病。
差不多在5月初的同一時間，也是那場大雨過后，西線的崖城幾個場小珍珠也是這個黑身爬底癥狀，死亡超過8成，一個場的技術(shù)員當(dāng)時用手機(jī)拍下病魚的腸道照片，可見明顯典型的微孢子的包囊，這個場我5月15號去的時候，還有不少苗爬底，解剖確診是微孢子蟲感染。
5月20號從煙堆采樣的幾條黑身爬底魚，已經(jīng)是離發(fā)病時候10多天了，腸道涂片是沒有發(fā)現(xiàn)明顯的微孢子蟲，但腸上皮細(xì)胞核呈嚴(yán)重溶解狀，有的核中有大的包涵體，但內(nèi)臟并沒有明顯的細(xì)菌，至于神經(jīng)壞死病毒，這兩天正在檢測。20號在煙堆從另外幾個場檢測到青斑和小珍珠，甚至小虎斑的腸道典型微孢子蟲病。
發(fā)病高峰期時，很遺憾我當(dāng)時沒有得到信息，沒有采到典型的病魚，但從后期調(diào)查看，這次大雨后的大范圍的流行死亡不太可能是神經(jīng)壞死病毒病，更不可能是弧菌感染，微孢子蟲病的急性發(fā)作應(yīng)值得懷疑，從今年檢測的多起車間斑苗病例看，以前微孢子蟲病有明顯瘦身，但今年幾個場瘦身癥狀并不明顯，就只是黑身爬底。這次病情值得注意的就是流行于5月初那兩天暴雨后，滲透壓變化是微孢子蟲萌發(fā)的必要條件，煙堆那一片本來就是這個蟲的重災(zāi)區(qū)，如果顯微鏡保養(yǎng)不好，或者不是經(jīng)常看腸道壓片，沒有一定經(jīng)驗，是很難辨別腸道中的微孢子蟲，這個蟲與腸上皮細(xì)胞中的顆粒或白便顆粒非常像。

南海漁醫(yī)

微孢子蟲典型腸道癥狀鏡檢照片

南海漁醫(yī)

微孢子蟲在腸道上皮細(xì)胞核中發(fā)育