病毒性神經壞死病毒繼發感染哈維氏弧菌引起青斑黑身、趴底死亡一例

玉。

[病例290]
        海南省文昌市會文鎮一室內青斑育苗水泥池，循環水養殖（見圖1），2014年4月28日放苗2萬尾，5月2日開始出現漲肚子、黑身、趴底死亡，用過一些營養保健藥物，效果不十分明顯。到5月9日，池中還剩下約3000~4000尾魚苗。

       2014年5月9日上午11點到現場，可見池底有大量黑身的魚，趴底，活力差（見圖2），測定水溫28℃。從池中取出2尾魚，一尾外觀正常的魚，一尾呈“黑身”的魚（見圖3）。將取的兩尾魚剪斷尾巴，從血液中接種進行細菌分離培養，并將整尾魚用95%酒精浸泡做病毒檢測。

       結果：兩尾魚均能檢測出病毒性神經壞死病毒，且病毒粒子含量高（見圖4）。正常魚的血液中未分離出細菌，黑身魚的血液中分離出大量的細菌（見圖5），經過16S rDNA測序鑒定，該分離菌為哈維氏弧菌（Vibrio harveyi）。

       分析：1、近年石斑魚育苗過程中由病毒性神經壞死病毒引起的“黑身”、“趴底”，死亡發病率非常高，危害也很大，嚴重者一夜之間死亡率達100%，該病毒主要危害幼魚和仔魚，對成魚危害不大。發病后常常繼發細菌感染，加重死亡。


       2、病毒性神經壞死病毒病主要通過親魚垂直傳播，魚卵的帶毒率高，目前該病沒有有效治療方法，通過提前處理水質，育苗過程中保持環境穩定，減少發病的誘發因素，可以減少該病的發生和降低死亡率。（利洋研究所 雷燕 王惠儒 利洋會文店 程寧提供 2014.07.03）

南海漁醫

5月初煙堆和馮家灣這次斑苗大面積的死亡，很值得商榷，并不是簡單的神經壞死病毒或弧菌感染，這次病害發生在大雨后的一兩天，主要是黑身爬底，接著大量死亡，幾天內很多場不管大小苗的青斑和珍珠都損失超過5成，沒爬底的也呈一定消瘦，大約5月10-15號左右才普遍穩定，我去采樣的時候是20號，調查了7-8個場，這個時候黑身爬底的已經很少了，但也采了發病后兩個場的幾條青斑和珍珠，聽幾個場主介紹，這次病害的黑身與神經壞死病毒病的癥狀完全不同，幾乎沒見在水面側臥“飄”的，而且大小苗都同時發病。
差不多在5月初的同一時間，也是那場大雨過后，西線的崖城幾個場小珍珠也是這個黑身爬底癥狀，死亡超過8成，一個場的技術員當時用手機拍下病魚的腸道照片，可見明顯典型的微孢子的包囊，這個場我5月15號去的時候，還有不少苗爬底，解剖確診是微孢子蟲感染。
5月20號從煙堆采樣的幾條黑身爬底魚，已經是離發病時候10多天了，腸道涂片是沒有發現明顯的微孢子蟲，但腸上皮細胞核呈嚴重溶解狀，有的核中有大的包涵體，但內臟并沒有明顯的細菌，至于神經壞死病毒，這兩天正在檢測。20號在煙堆從另外幾個場檢測到青斑和小珍珠，甚至小虎斑的腸道典型微孢子蟲病。
發病高峰期時，很遺憾我當時沒有得到信息，沒有采到典型的病魚，但從后期調查看，這次大雨后的大范圍的流行死亡不太可能是神經壞死病毒病，更不可能是弧菌感染，微孢子蟲病的急性發作應值得懷疑，從今年檢測的多起車間斑苗病例看，以前微孢子蟲病有明顯瘦身，但今年幾個場瘦身癥狀并不明顯，就只是黑身爬底。這次病情值得注意的就是流行于5月初那兩天暴雨后，滲透壓變化是微孢子蟲萌發的必要條件，煙堆那一片本來就是這個蟲的重災區，如果顯微鏡保養不好，或者不是經常看腸道壓片，沒有一定經驗，是很難辨別腸道中的微孢子蟲，這個蟲與腸上皮細胞中的顆粒或白便顆粒非常像。

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微孢子蟲典型腸道癥狀鏡檢照片

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微孢子蟲在腸道上皮細胞核中發育