枯草芽孢桿菌對泥蚶及養殖底泥中細菌總數和弧菌總數的影響
——摘自《海洋科學》 摘要: 以平板計數法, 研究了不同濃度枯草芽孢桿菌對泥蚶及養殖底泥中細菌總數和弧菌總數的影響。試驗分為1 × 10^6 , 5 × 10^6 和10× 10^6 CFU/L 3 個濃度試驗組和對照組, 試驗共進行28 d, 在第0、7、14、21 和28 天時采底泥和泥蚶, 采用平板計數法檢測細菌總數和弧菌總數。結果顯示, 在投施枯草芽孢桿菌后7 d 內, 養殖底泥和泥蚶體內細菌總數均呈明顯上升趨勢, 7~ 28 d內緩慢下降, 但差異不顯著; 投施枯草芽孢桿菌后, 各試驗組底泥和泥蚶體內弧菌總數顯著低于對照組, 5 × 10^6 CFU/L 和10 × 10^6 CFU/L 試驗組弧菌總數顯著低于1 × 10^6 CFU/L 試驗組。結果表明枯草芽孢桿菌具有抑制弧菌增殖的作用, 枯草芽孢桿菌可應用于泥蚶池塘養殖。 關鍵詞: 泥蚶; 枯草芽孢桿菌; 細菌總數; 弧菌
近幾年, 隨著中國灘涂和圍塘貝類養殖規模的擴大, 在每年溫度上升的4、5月份和繁殖后的9、10月份, 主要灘涂養殖貝類易發生病害死亡, 在浙江沿海養殖的泥蚶、青蛤、縊蟶和文蛤都發生不同程度的病害死亡,嚴重影響了養殖效益, 研究工作者們正在從不同研究角度探索可能的解決對策。 枯草芽孢桿菌是目前廣泛應用的一類益生菌, 可改善養殖水體環境質量和維持養殖動物消化道微生境的生態平衡, 提高養殖動物免疫能力, 以及促進動物生長等, 且無污染、無殘留、不產生抗藥性, 無水產品質量安全隱患, 具有廣泛的應用前景。近年來, 國內外學者對枯草芽孢桿菌的分離和培養條件優化、枯草芽孢桿菌的免疫促進作用和環境改良, 以及與病原微生物的對峙試驗都進行了大量的研究工作, 而上述研究大都集中在養殖魚、蝦方面, 而關于養殖貝類研究報道甚少,對泥蚶的研究還未見報道。本研究通過在泥蚶養殖過程中投施不同濃度的枯草芽孢桿菌, 研究不同濃度的枯草芽孢桿菌對泥蚶及養殖底泥中細菌總數和弧菌總數的影響, 探求芽孢桿菌的抑菌效果, 以期為泥蚶養殖環境的改良和泥蚶產品質量控制提供參考數據。
1. 枯草芽孢桿菌對底泥和泥蚶體內細菌總數的影響 結果顯示, 投喂枯草芽孢桿菌后7 d 內,各試驗組中的底泥和泥蚶體內細菌總數( 包括芽孢桿菌) 不斷升高, 呈現相似的增長趨勢, 底泥中細菌總數最高峰達到了2.51 × 10^13 CFU/g, 在7 ~ 14 d后顯著降低, 細菌總數基本保持穩定; 在14~ 28 d 內基本保持平衡, 14、21 和28 d 時, 各試驗組底泥和泥蚶體內細菌總數都顯著低于對照組水平。
2. 枯草芽孢桿菌對底泥和泥蚶體內弧菌總數的影響 在投喂芽孢桿菌的前7 d 內, 3 個試驗組中的底泥和體內弧菌總數顯著降低, 呈現相似的下降趨勢; 投施枯草芽孢桿菌后, 各試驗組底泥和泥蚶體內弧菌總數顯著低于對照組, 5 × 10^6 CFU/L 和10 × 10^6 CFU/L試驗組弧菌總數顯著低于1 × 10^6 CFU/L 試驗組。28 d 時, 10 × 106 CFU/L 試驗組底泥和泥蚶體內的弧菌生長達到最小值, 底泥為1 × 10^8 CFU/g, 泥蚶體內為63 CFU/g。
3. 結論 枯草芽孢桿菌可作為一種水質調節劑, 凈化養殖水環境, 枯草芽孢桿菌降低養殖水體氨氮、亞硝酸鹽和COD 等方面的研究已有報道, 丁雷等報道芽孢菌能改善養魚水質; 劉穎等報道在養殖水體中加入特定的芽孢桿菌及酵母菌, 能使其定殖于養殖水體, 生長繁殖后測定各項水質指標, 證明其能迅速而有效地降低水中亞硝酸鹽的含量, 并對水中溶氧的影響較小, 能夠有效地改善養殖水體的水質狀況。同時, 枯草芽孢桿菌作為益生菌, 對弧菌等條件致病菌具有明顯的抑制作用。王芳等報道了枯草芽孢桿菌中富含抗菌成分, 并提純了其抗菌活性成分; 黃汝添等研究了枯草芽孢桿菌Bs-1抗菌物質產生的特點和對溶藻弧菌的拮抗能力, 結果表明Bs-1 產生的抗菌物質能抑制多種分離自養殖大海馬腸道和海水的弧菌如溶藻弧菌的生長; 每升海水中加入4mL培養液( 4×10^6 CFU/mL) 已能達到較好的抑菌效果。伏傳永報道枯草芽孢桿菌對刺參病原菌具有很強的拮抗作用; 陳莉等采用平板對峙法測定枯草芽孢桿菌N1729 對棉花病原菌的抑菌效果, 結果表明該菌對棉花立枯病菌、枯萎病菌和黃萎病菌均具有較強的抑菌作用, 其中對立枯病菌的抑制率為45.7%, 該菌無細胞濾液對以上3 種病原菌具有一定的抑菌作用。本研究結果表明, 投施枯草芽孢桿菌28 d, 試驗組細菌總數和弧菌總數顯著低于對照組水平, 顯示出了枯草芽孢桿菌對海水中的弧菌具有良好的拮抗作用, 與上述的研究觀點一致。證實了枯草芽孢桿菌對底泥和泥蚶體內一些細菌和條件性致病菌弧菌具有拮抗作用。
許多研究證實枯草芽孢桿菌可以改善水體和體內細菌菌群變化。伏傳永報道每升海水中加入3.0~ 4.0 mL 枯草芽孢桿菌菌液即可較有效地控制養殖海水中弧菌和屈撓桿菌的數量。本研究發現在投喂芽孢桿菌的前7 d 內, 3 個試驗組中的底泥和體內細菌總數不斷升高, 呈現相似的增長趨勢, 這可能是芽孢桿菌促進了有益菌群的生長或與芽孢桿菌的投入量有關; 而在7 ~ 14 d 后細菌總數顯著降低, 表明枯草芽孢桿菌對細菌的拮抗作用顯示出一定的效果, 抑制了有害細菌的生長與自身新陳代謝的結果; 在14~ 30 d內基本保持平衡, 最終底泥和泥蚶體內的細菌總數明顯低于對照組, 說明在這個時期, 以枯草芽孢桿菌為主的微生態制劑在改善養殖水體環境, 使養殖底泥和泥蚶體內保持微生態平衡。這些微生物生態平衡與水體菌群變化, 具體機制如何, 還有待于進一步的研究證實。
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