本帖最后由 一片云 于 2016-1-11 11:06 編輯
對蝦的紅體、偷死、肌肉白濁、爛眼爛鰓、熒光、黑斑等癥狀多由弧菌及嗜水氣單胞菌等引起。根據現行國家標準,抗菌類中藥制劑有38種。本實驗選取 水產養殖中常用的大黃末、六味黃龍散、三黃散、根蓮解毒散、七味板藍根散、大蒜素、蝦倍健、病毒速滅亡、穿梅三黃散、白頭翁口服液、健肝寶、地錦草末12種中藥制劑對5株常見的海洋致病菌進行最低抑菌濃度的測定,為 水產養殖細菌性疾病的防治提供用藥參考。 藥物準備: 六味黃龍散(龍膽、黃柏、陳皮、厚樸、大黃等);每1kg飼料用本品4g 三黃散(黃芩、黃柏、大黃、大青葉);每1kg飼料用本品5g 根蓮解毒散(板藍根、黃芪、穿心蓮、魚腥草等);每1kg飼料加本品10g 七味板藍根散(板藍根、大黃、黃芪、黃柏、黃蓮等);每1kg飼料用本品2.5g 大蒜素(含量:25%);每1kg飼料用本品0.6g 蝦倍。嬆救~、半邊蓮花、地膽草等8味);按本品:蝦倍健顆粒為1:3~1:4(土塘1:5)的比例拌勻,于上午喂第一餐料前投喂。 病毒速滅亡(大黃提取液,黃芪多糖等);每1kg飼料,用本品20ml 穿梅三黃散(黃芩、黃柏、大黃、大青葉、穿心蓮等);每1kg飼料用本品4g 白頭翁口服液(白頭翁、黃連、黃柏、秦皮);每1kg飼料用本品3ml 健肝寶(茵陳、大黃、郁金、連翹、柴胡);每1kg飼料用本品2g 地錦草末(地錦草);每1kg飼料用本品10g 菌液準備: 1.用接種環挑取標準菌株的菌落,接種于10ml的2216E液體培養基中,37℃孵育18h。 2.用2216E液體培養基校正濃度至0.5麥氏比濁標準,約含1×108CFU/ml,經肉湯1∶100稀釋。 實驗步驟: 1.藥物配制:分別取上述藥物按包裝標示量制備藥液。 藥物 按標示量配制(g/L) NZ方 — 大黃末 5 六味黃龍散 4 三黃散 5 根蓮解毒散 10 七味板藍根散 2.5 大蒜素 0.6 蝦倍健 200 病毒速滅亡 20 穿梅三黃散 4 白頭翁口服液 3 健肝寶 2 地錦草 10 藥物稀釋:取滅菌5mlEP管12管,排成一排,除第1管加入不加水外,其余每管加水1ml,在第1管加入配制好的藥液2ml,然后吸取1ml至第2管,混勻后再吸取1ml至第3管,如此連續倍比稀釋至第11管,并從第11管中吸取1ml棄去,第12管為不含藥物的對照。 3.加菌液:將倍比稀釋后不同濃度的藥物溶液及菌液分別加到滅菌的96孔板中,每孔各100μl。置于37℃孵育18h。 結果觀察: 將孵育后的96孔板取出,無菌操作,每孔取2.5ul涂于2216E瓊脂板,18h后,以抑制細菌生長的瓊脂板所對應的濃度為最低抑菌濃度。得到以下結果: 藥物 副溶血弧菌 溶藻弧菌 哈維弧菌 創傷弧菌 嗜水氣單胞菌 大黃末 - - - - - 六味黃龍散 - - - - - 三黃散 - - - - - 根蓮解毒散 - - - - - 七味板藍根散 - - - - - 大蒜素 - - - - - 蝦倍健 + + + + + 病毒速滅亡 - - - - - 穿梅三黃散 - - - - - 白頭翁口服液 - - - - - 健肝寶 - - - - - 地錦草末 - - - - - 結果可知,按標示量配制,除“蝦倍健”外其他藥物均無抑菌作用。 分別取上述藥物各16g制備成100ml的濃藥液。此時各管藥物濃度依次為160、80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156 、0 g/L。 重復上述實驗步驟,得到以下實驗結果(圖):
中草藥以其安全、副作用小、無耐藥性等獨特的優勢,逐漸成為研究和開發的熱點,市面上標榜抗菌的中草藥五花八門,但加工粗糙,質量良莠不齊,夸大藥效,而養殖戶面對細菌感染疾病的爆發卻無可奈何,抱著嘗試的心態,盲目用藥,最終用藥無效,對中藥產品失去信心。然而實驗結果也表明了“蝦倍健”有別于市面一般的中藥產品,對常見的致病弧菌及嗜水氣單胞菌均具有良好的抑殺作用。 在實驗隨機選取的12種養殖過程常用的抗菌中藥的實驗結果看來,情況令人堪憂,經典的抗菌中藥產品——大蒜素、三黃散、七味板藍根散等最低抑菌濃度均達到80及以上,甚至超過160mg/ml。而蝦倍健對各類弧菌的抑菌濃度為0.625mg/ml,比市售中藥類抑菌藥物高出32倍!
已公開發表論文連接如下:
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-BJNY201514192.htm
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