南美白對蝦“黑腳偷死”，檢出偷死野田村病毒一例

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[病例401]
       福建省漳州市東山縣西埔鎮(zhèn)一南美白對蝦養(yǎng)殖池塘，高位池，冬棚，面積1.8畝，平均水深1.6米，底部納米管增氧（見圖1），2016年11月13日一次性放苗50萬尾，目前規(guī)格160尾/kg左右，每日三餐，兩餐投喂飼料，一餐投喂凍豐年蟲。
       2017年2月15日，在池塘的排污口處發(fā)現(xiàn)1尾死蝦；
       2月16日，在排污口處發(fā)現(xiàn)80尾死蝦，部分死蝦呈現(xiàn)“黑腳”癥；
       2月17日，在排污口處發(fā)現(xiàn)200尾死蝦，下午3點40分到該養(yǎng)殖池塘調(diào)查，測定水溫23.3℃，水質(zhì)指標(biāo)pH值8.0、氨氮0.4mg/L、亞硝酸鹽0.4mg/L、溶解氧7.03mg/L，水中藻類以綠藻為主。在池塘的樓梯口處可見發(fā)病蝦距水面5~10cm處游水（見圖2），從池塘中部排污口處撈出大量偷死蝦，偷死蝦有三分之一呈“黑腳”癥（見圖3）。從料臺取4尾未發(fā)病蝦（見圖4）、樓梯口處取8尾發(fā)病的蝦（見圖5），從所取12尾蝦的肝胰腺中接種進行細菌分離培養(yǎng)，并取樣品分別用95%酒精和波恩氏固定液固定做病毒檢測和組織病理切片分析，同時取6尾死蝦（見圖6）用95%酒精固定做病毒檢測。
       2月18日，共偷死100斤蝦；
       2月19日，共偷死700斤蝦；
       2月20日，抓蝦。
       結(jié)果：在28℃經(jīng)24小時培養(yǎng)，4尾未發(fā)病蝦蝦肝胰腺中未分理出細菌，8尾病蝦其中5尾肝胰腺中分離出大量細菌（見圖7），分離菌經(jīng)16S rDNA測序比對初步鑒定為哈維氏弧菌；對采取的18尾蝦樣品用（RT-）PCR進行病毒檢測，結(jié)果顯示采取的18尾南美白對蝦白斑癥病毒（WSSV）、傳染性皮下及造血器官壞死病毒（IHHNV）、對蝦桿狀病毒（BP）、肝胰腺細小病毒（HPV）、蝦肝腸胞蟲（EHP）、桃拉病毒（TSV）、黃頭病毒（YHV）、傳染性肌肉壞死病毒（IMNV）、虹彩病毒（IV）均呈陰性；4尾未發(fā)病蝦和8尾發(fā)病蝦偷死野田村病毒（CMNV）均呈陽性，6尾死蝦中有2尾偷死野田村病毒呈陽性（見圖8），將陽性樣品的PCR擴增產(chǎn)物進行測序比對，其序列與GenBank中偷死野田村病毒的同源性為99.5%。組織病理切片可見肝胰腺腺管萎縮、腺管間水腫（見圖9），其它組織未見明顯異常。
       分析：1、2016年11月，在福建地區(qū)高位池和水泥池養(yǎng)殖的南美白對蝦出現(xiàn)了一種養(yǎng)殖戶稱為“黑腳偷死”的疾病，具有明顯的傳染性，嚴重的死亡率高達60%。2014年中科院黃海所科研人員通過研究，證實一種新型的野田村病毒是導(dǎo)致對蝦偷死病的疑似病原，這種病毒被命名為對蝦“偷死野田村病毒”。
       2、本病例中未發(fā)病蝦和病蝦都感染了偷死野田村病毒，部分病蝦能分離出大量的細菌，本病例是否是由偷死野田村病毒感染或繼發(fā)細菌感染引起的發(fā)病，尚需要進一步的流行病學(xué)調(diào)查和更多的案例來證實。（利洋水產(chǎn)研究所 雷燕 張文文 戚瑞榮 利洋西埔店 張強 提供 2017.03.09）

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